一种新型抗真菌抗生素的分离纯化与结构鉴定
真菌感染发病率大幅度上升，尤其是深部真菌感染，正不断威胁着人类的健康。所以，寻求新型、高效、安全的抗真菌药物的研究迫在眉睫。课题组筛选得到一株芽孢杆菌B.subtilis CGMCC4140，能产生抗真菌抗生素，对引起深部真菌感染的白色念珠菌具有很好的抑制作用。本文对抗真菌物质进行了分离纯化，并对其进行了结构鉴定，为该抗生素的进一步研究和开发奠定了基础。 本文首先对发酵液中抗生素稳定性进行了测定，研究了放置时间、温度、pH、光照对其抑菌效果的影响，并进行HPLC分析，结果显示:该抗生素稳定性较高。 分离纯化工艺首先对发酵液进行了预处理，发酵液经5000 r/min离心15min除去菌体细胞、未用完培养基等杂质后，选用浓度0.06 g/L聚丙烯酰胺为絮凝剂除去残留在发酵液中的菌体碎片、胶体蛋白等物质。预处理过的发酵液用大孔树脂吸附层析法进行初步分离，选用大孔吸附树脂HP20作为大孔吸附剂，然后对其静态吸附性能与动态洗脱效果进行研究，优化后的工艺条件为:上样液以1.5BV/h(55cm/h)的流速上柱，在吸附达到平衡后用去离子水冲洗，再用10％的乙醇-水溶液以相同流速洗脱，收率为83.9％。粗提物经过C18反相层析获得纯品，纯度达到96.21％，最终效价达到17861.8 U/mg（相当于制霉菌素2.7mg/mg）。 抗生素通过质谱、核磁共振等分析手段，得知该化合物分子量为402 Da，分子式为C24H34O5，为一种新型大环内酯类抗真菌抗生素。对不同菌种抑菌实验发现该抗生素对白色假丝酵母具有较高的抑菌活性，对丝状真菌及革兰氏阴性菌也有一定抑制作用，但对革兰氏阳性菌无抑制作用，抑菌谱较广，其中对白色念珠菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.098～0.195 ug/mL。该抗生素具有较高的药用开发前景。
抗生素;分离纯化;色谱分析;结构鉴定
浙江大学
硕士
生物化工
吴绵斌
2012
中文
TQ460.72;O657.7
76
2013-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）