瘦素与CD105在胶质瘤组织中的表达及其相关性研究
目的：胶质瘤是颅内最常见的恶性肿瘤，手术、放射及化学药物治疗均难以治愈，呈侵袭性生长、易于复发，且多为原位复发，极少远处转移。瘦素(Leptin)在某些恶性肿瘤中已成为一种重要的生物标记物，但瘦素系统在人脑肿瘤发生发展中的作用仍不十分清楚，其作用机制仍未得到明显的证实。CD105可在新生血管内皮细胞上作为一种微血管密度(Microvascular Density MVD)的标记物。本课题旨在通过免疫组化的方法检测Leptin在脑胶质瘤组织中的表达情况及其与血管生成之间的关系及意义，分析二者之间的关系及可能作用，并试分析Leptin、CD105与脑胶质瘤病理级别之间的关系，从而能更准确地评价胶质瘤的恶性程度、判断预后、制定有效的预防措施及治疗策略提供依据。
方法：选取济宁市第一人民医院神经外科肿瘤病区自2010年01月至2011年12月的胶质瘤患者的标本组织共计54例，另选取颅脑外伤或功能性疾病术后正常脑组织14例作为对照。所有患者术前均未接受化疗或放疗。所选标本纳入标准均参照世界卫生组织（2007年版）的关于脑胶质瘤的组织分类标准及病理级别标准。所选取的实验组组织标本均经过10％福尔马林液体溶液固定，然后常规石蜡进行包埋。对照组14例为因颅脑外伤后行手术治疗内减压后或其他功能性疾病行手术治疗后而切除的部分正常脑组织作为对照，同法固定。
试验方法：均采用免疫组织化学法。正常脑组织作为对照组，对照组以PBS作为-抗进行空白对照。Leptin阳性结果表达为肿瘤细胞的细胞浆中出现棕黄色颗粒。CD105阳性结果表达为新生血管内皮细胞膜出现棕黄色颗粒。Leptin计分标准均参照Hilbe等的方法，随机选取4个高倍镜视野(×400)，计数视野内阳性细胞占细胞总数的百分比。标准为:未发现阳性细胞的为（-），阳性细胞数占细胞总数的25％以下为(+)，25～50％为(++)，51～75％为（+++），75％以上为(++++)，分别计分为0、1、2、3、4分。CD105计数方法以与背景明显有别的任何一个棕黄色染色的内皮细胞或细胞丛作为一个血管，只要在结构上不保持连续性，一些分支结构也可以作为一个血管用来计数，管径大于8个红细胞并具有肌层的血管不作为新生血管。先在低倍镜下选取微血管分布密集区域，然后在200倍显微镜下计数5个视野被染成棕黄色的血管数目，取其平均值作为微血管密度，染色模糊或分辨不清的细胞排除在外。采用统计学软件SPSS17.0对数据进行处理，结果根据数据类型，对结果分别选用非参数检验分析及Spearman等级相关分析，p＜0.05为差异有统计学意义。
结果：
(1)14例正常脑组织标本中未检测到Leptin及CD105的表达。
(2)54例人脑胶质瘤标本中Leptin阳性表达率平均值为25.38±2194％，CD105的阳性表达率平均值为31.95±27.41％。
(3) Leptin及CD105总的阳性细胞表达率应用spearman等级相关分析得出:均随着胶质瘤病理级别的增加而增高（p＜0.01）。
(4)人脑胶质瘤中Leptin的阳性细胞表达率和CD105的阳性细胞表达率应用spearman等级相关分析得出:二者成正相关(p＜0.01)。
结论：
1、人脑胶质瘤标本中Leptin和CD105呈现高表达。而正常脑组织标本中无Leptin和CD105的表达。
2、人脑胶质瘤标本中Leptin和CD105的阳性表达率，Ⅲ、Ⅳ级（高级别）均明显高于Ⅰ、Ⅱ级（低级别）。
3、人脑胶质瘤标本中Leptin和CD105的阳性表达率在人脑胶质瘤中表达强度随病理级别增加而增强。
4、Leptin的阳性细胞表达率和CD105的阳性细胞表达率在人脑胶质瘤病理级别中都成正相关，二者之间有同一趋势。
胶质瘤;瘦素;表达微血管密度;免疫组织化学
济南大学
硕士
外科学(神经外科)
陈剑
2013
中文
R739.41
54
2013-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）