D-半乳糖致小鼠老年痴呆模型及药物干预作用观察
[目的]
采用高浓度的D-半乳糖持续皮下注射小鼠，建立小鼠老年痴呆模型，并使用脑复康、阿司匹林、水杨酸、抗衰老1号等药物进行治疗，通过morris水迷宫训练、生化检测、病理组织切片、骨生物力学检测等手段观察小鼠学习、记忆能力，测定血清、脑超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)活性，观察大脑海马区组织形态和小鼠右股骨平均最大载荷值，观察药物对老年痴呆小鼠模型的干预作用。
[方法]
选取4月龄雌性小鼠60只，体重(29.5±2.04)g，随机分为6组:正常对照组(Cont)，模型组(D-Gal)，模型+脑复康组(D+NFK)，模型邯可司匹林组(D+ASP)，模型+水杨酸组(D+SYS)和模型+抗衰老1号组(D+KSL1)，每组10只小鼠。于实验开始时，正常对照组(Cont):生理盐水灌胃和皮下注射对照;模型组(D-Gal):D-半乳糖皮下注射120mg·kg-1·d-1，生理盐水灌胃;模型+脑复康组(D+NFK):D-半乳糖皮下注射120mg·kg-1·d-1，脑复康按0.54g·kg-1·d-1灌胃给药;模型+可司匹林组(D+ASP):D-半乳糖皮下注射120mg·kg-1·d-1，阿司匹林按7.5mg·kg-1·d-1灌胃给药;模型+水杨酸组(D+SYS):D-半乳糖皮下注射120mg·kg-1·d-1，水杨酸按6mg·kg-1·d-1灌胃;模型+抗衰老1号组(D+KSL1):D-半乳糖皮下注射120mg·kg-1·d-1，抗衰老1号（含人参皂苷150mg、原儿茶醛37.5mg、维生素E50mg）按35.6mg·kg-1·d-1灌胃给药。各组小鼠饲养条件相同，平均每6d记录一次体重情况，实验为期55d（含观察期）。
实验第45天分别随机抽取各组4个小鼠进行morris水迷宫练习。实验结束时，小鼠眼球取血处死，分离血清作生化指标（超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT及丙二醛MDA）活性测定;取左脑组织，石蜡包埋，连续切片，HE染色进行海马区形态学分析，取右脑组织做脑匀浆测超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA);分离右股骨作生物力学三点弯曲试验。
[结果]
1长期高浓度的D-半乳糖持续皮下注射小鼠可致小鼠老年性痴呆
1.1在Morris水迷宫的定航实验中，模型组与正常对照组比较2，3，4d平均潜伏期比正常对照组长(P＜0.01);在空间探索实验中，模型组第一象限平均路程和时间百分比也有降低的趋势，提示模型组小鼠学习记忆能力明显下降。
1.2血清指标测试结果显示，模型组与正常对照组相比，血清SOD升高(P＜0.05)，血清CAT浓度及MDA浓度无统计学意义。
1.3脑匀浆指标测试结果显示，模型组脑匀浆SOD浓度比正常对照组低(P＜0.05)，MDA浓度无统计学意义。
1.4脑切片观察结果显示，与正常对照组相比，模型组海马区细胞蓝染深，细胞层薄稀疏，细胞核变小且不规则，着色不均匀，有核固缩，边缘有细胞凋亡现象。
1.5骨生物力学平均最大载荷实验结果显示，与正常对照组相比，模型组平均最大载荷稍高，但无统计学意义。
2脑复康有减轻D-半乳糖所致小鼠老年性痴呆的作用
2.1在Morris水迷宫的定航实验中，脑复康组与模型组比较1，2，3，4d平均潜伏期比正常对照组短(P＜0.01);在空间探索实验中，脑复康组第一象限平均路程和时间百分比也有增高的趋势，提示学习记忆能力明显升高。
2.2血清指标测试结果显示，与模型组相比，脑复康组血清SOD、CAT浓度升高，血清MDA浓度降低，但均无统计学意义。
2.3脑匀浆指标测试结果显示，脑复康组脑匀浆SOD浓度，MDA浓度比模型组低，但均无统计学意义。
2.4脑切片观察结果显示，脑复康组脑海马区切片细胞与模型组相比，海马区细胞较完整，为圆形或椭圆形，结构清晰，着色为浅蓝紫色，细胞形态规则，细胞间隙小，细胞数目较多，排列整齐，坏死细胞较少。
2.5骨生物力学平均最大载荷实验结果显示，脑复康组骨生物力学的平均最大载荷比模型组高（P＜0.05）。
3阿司匹林也有减轻D-半乳糖所致小鼠老年性痴呆的作用
3.1在Morris水迷宫的定航实验中，阿司匹林组与模型组比较3，4，5d平均潜伏期短（第3，4dP＜0.01，第5d P＜0.05）;在空间探索实验中，阿司匹林组第一象限平均路程和时间百分比也有增高的趋势（P＜0.01），提示学习能力明显升高。
3.2血清指标测试结果显示，与模型组相比，阿司匹林组血清SOD、CAT浓度升高，血清MDA浓度降低，但均无统计学意义。
3.3脑匀浆指标测试结果显示，阿司匹林组脑匀浆SOD浓度比模型组稍低，MDA浓度比模型组低，但均无统计学意义。
3.4脑切片观察结果显示，阿司匹林组脑海马区切片细胞与模型组相比，细胞较完整，着色为浅蓝紫色，细胞形态规则，细胞间隙小，细胞数目较多，排列较整齐。
3.5骨生物力学平均最大载荷实验结果显示，阿司匹林组骨生物力学的平均最大载荷比正常对照组(P＜0.05)和模型组稍高。
4水杨酸对D-半乳糖所致小鼠老年性痴呆无明显影响
4.1在Morris水迷宫的定航实验中，与模型组相比，水杨酸组小鼠学习能力无明显提高;水杨酸组与脑复康组比较1，2，3平均潜伏期比正常对照组长(P＜0.01)。
4.2血清指标测试结果显示，与模型组相比，水杨酸组血清SOD降低，血清MDA浓度升高，但均无统计学意义，血清CAT浓度升高(P＜0.05)。
4.3脑匀浆指标测试结果显示，水杨酸组脑匀浆SOD浓度比模型组低（P＜0.05）;MDA浓度比模型组低（P＜0.01）。
4.4脑切片观察结果显示，与正常对照组相比，水杨酸组脑海马区切片细胞蓝染深，细胞层较薄，细胞形态不规则，细胞间隙明显增大，细胞数目较少。
4.5骨生物力学的平均最大载荷实验结果显示，水杨酸组骨生物力学的平均最大载荷比模型组稍高(P＜0.01)。
5抗衰老1号对D-半乳糖所致小鼠老年性痴呆模型有明显影响
5.1在Morris水迷宫的空间探索实验中，与模型组相比，抗衰老1号组小鼠第一象限平均路程和时间百分比有增高的趋势。
5.2血清指标测试结果显示，与模型组相比，抗衰老1号血清SOD、CAT浓度升高，MDA血清浓度降低，但均无统计学意义。
5.3脑匀浆指标测试结果显示，抗衰老1号组SOD浓度比模型组稍低，但无统计学意义;MDA浓度比模型组低，且具有统计学意义(P＜0.05)。
5.4脑切片观察结果显示，抗衰老1号组脑海马区切片细胞较完整，为圆形或椭圆形，结构清晰，着色为浅蓝紫色，细胞形态规则，细胞间隙小，细胞数目较多，排列整齐，边缘较少坏死细胞。
5.5骨生物力学的平均最大载荷实验结果显示，抗衰老1号骨生物力学的平均最大载荷比模型组稍高，但无统计学意义。
[结论]
1长期高浓度的D-半乳糖持续皮下注射小鼠可致小鼠老年痴呆;
2脑复康、阿司匹林、抗衰老1号对D-半乳糖所致小鼠老年痴呆模型有积极干预作用，水杨酸无明显干预作用。
D-半乳糖;抗老年痴呆;药物干预;动物模型
广东医学院
硕士
药理学
吴铁;刘义
2013
中文
R965.1;R749.16
67
2013-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）