恒河猴脑结核与大脑β淀粉样蛋白沉积的相关性研究
[目的]
选取自发性感染结核的恒河猴作为研究对象，通过结核菌素皮下试验(Tuberculin Skin Test，TST)初步诊断、组织病理检查确诊为结核感染后，进一步检测脑部β淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）的沉积情况。通过分析脑部结核感染与阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)脑部特征性沉积物Aβ，β分泌酶(β-secretes，BACE)和星形胶质细胞(Astrocyte，AST)的相关性，为AD的发病机制及防治研究提供新思路。
[方法]
1.实验动物
研究对象为3只恒河猴:A猴(No.G05032)和B猴(No.G05008)为自发性结核感染恒河猴，来源于猴场养殖过程中TST检测阳性的猴，C猴(No.89001)为空白对照健康恒河猴，TST检测阴性。
2.结核感染的组织病理诊断
将恒河猴处死后，进行病理检查的组织器官包括:大脑、小脑、延髓、肺脏、心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胃肠道、泌尿生殖系统、胸廓、肺门淋巴结、腹股沟和腋窝等位置的浅表淋巴结。组织器官取材后置于中性甲醛固定液中固定，常规石蜡包埋制作组织切片，HE染色，显微镜下观察病理变化。
3.脑部β淀粉样蛋白沉积及相关指标检测
利用免疫组织化学染色法和图像分析系统，检测恒河猴大脑枕叶、海马和基底核组织切片的Aβ沉积及相关指标:①Aβ1-42:Aβ神经毒性较强的亚型;②BACE-1:Aβ合成的主要限速酶—β分泌酶(β-secretes，BACE)的主要存在形式③GFAP:清除Aβ的主要细胞—星形胶质细胞（Astrocyte，AST）的特异性标志物。
[结果]
1.恒河猴感染结核的组织病理诊断结果
显微镜下组织病理检查结果显示:A猴:肺门淋巴结、肺脏、脾脏、肾脏可见典型的结核病变，大脑可见结核瘤;B猴:肺脏、脾脏出现了典型结核病变;肝脏出现增生性病灶，病灶中心干酪样特征不明显，脑部未见结核病变;C猴:各组织器官未见结核病变。
2.恒河猴脑结核组织病理特征
在本实验的3只恒河猴中，只有在A猴中发现脑部结核病变，结核病变出现在大脑枕叶区域及相邻组织，枕叶结核瘤病灶镜下显示大面积干酪样坏死，病灶中心见干酪样坏死物质和钙盐沉积，外围见上皮样细胞和巨噬细胞层、成纤维细胞形成的包裹和淋巴细胞带，病灶周围的血管见“套袖样浸润”。在大脑枕叶结核瘤周围的脑组织、大脑顶叶及海马区可见出现不同程度的神经元损伤。
3.恒河猴脑部β淀粉样蛋白沉积及相关指标检测情况
对恒河猴大脑枕叶、海马和基底核组织切片的Aβ沉积及相关指标免疫组化检测结果显示:A猴基底核区的Aβ1-42，BACE-1阳性细胞数量与B猴、C猴比较显著增多(P＜0.05);A猴大脑枕叶，基底核区，海马齿状回GFAP阳性细胞的数量与B猴、C猴比较显著增多(P＜0.05);B猴大脑枕叶、基底核区及海马齿状回的Aβ1-42、BACE-1、GFAP阳性细胞数量与C猴比较，均未出现显著差异(P＞0.05)。
[结论]
本研究结果显示，在结核杆菌侵袭至脑组织形成结核病灶的结核恒河猴中，发现其大脑出现β淀粉样蛋白沉积，而在无脑结核病灶的结核恒河猴中，未出现大脑出现β淀粉样蛋白沉积。脑结核猴脑中Aβ沉积的产生与增多，原因可能是结核感染诱导具有抗菌活性的Aβ表达增多;或者结核感染刺激脑内BACE-1生成增多，进而使Aβ合成增多;同时，结核感染使活化的星形胶质细胞数量增加，增强了Aβ合成沉积的趋势。在上述相互关联、功能多样的调控机制下，总体使脑内Aβ沉积增多。大脑结核感染与脑内β淀粉样蛋白沉积伴随出现，提示了大脑结核感染可能与阿尔茨海默病的发生发展过程密切相关。
β淀粉样蛋白;结核感染;阿尔茨海默病;脑部特征性沉积物;发病机制
广东医学院
硕士
药理学
黄韧;张钰
2013
中文
R749.16;R529.3
51
2013-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）