酒精对兔骨髓间充质干细胞成骨分化的影响研究
目的:对兔股骨头髓内间充质干细胞进行分离，分析观察充质干细胞(BMSCs)在体外培养状态下的生长情况，对两种成骨细胞诱导分化方法及分化能力进行对比，并研究观察酒精对体外培养成骨细胞凋亡的影响。
方法:运用密度梯度离心法获取兔骨髓间充质干细胞，采用倒置显微镜进行形态学观察;实验组:为用含有诱导剂的低糖DMEM培养基的诱导培养组;对照组:为常规培养组，倒置显微镜HE染色观察记录各代次细胞形态等特征;通过碱性磷酸酶(ALP)染色及标准化钙结节计数，鉴定细倒置显微镜及HE染色观察记录细胞形态等特征。体外分离培养成骨细胞后，随机分组进行不同浓度酒精干预，利用AO/EB染色观察细胞凋亡形态学改变。
结果:培养12天后对两组细胞进行ALP染色，显示实验组细胞质内ALP染色阳性反应明显，对照组染色显色弱，实验组细胞钙化结节数量多且较大，对照组也有钙结节形成，但较小。实验组标准化钙结节计数显著高于对照组，差异具有显著统计学意义(P＜0.05），加入0.15 mol/L酒精干预后，成骨细胞发生皱缩，AO/EB染色出现凋亡细胞。
结论:通过密度梯度离心贴壁法所获得的BMSCs在常规培养或诱导培养时均可表现出成骨潜能，诱导培养成骨能力确切，可为骨组织实验研究提供理想的细胞模型，酒精可以引起体外培养成骨细胞凋亡，是酒精性骨损害的发生机制之一。
骨髓间充质干细胞;酒精;成骨分化;股骨头;体外培养
广西中医药大学
硕士
中医骨伤科学
陈跃平
2013
中文
R681.8
34
2013-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）