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溶髓方对椎间盘软骨终板细胞凋亡的影响

郭艳军
广西中医药大学
引用
目的:研究溶髓方在防治椎间盘软骨终板退变的作用机理。   方法:选取健康Wistar大白鼠36只,随机分为空白对照组、病理模型组和实验组。实验组和病理模型组采用手术造模方式建立动物模型,即沿大鼠C1-C7棘突做后正中切口,剥离椎旁肌肉,切除C1-C7的棘上、棘间韧带及两侧关节突关节后外1/2,诱发椎间盘加速退变;空白对照组做假手术,切开皮肤之后缝合。术后1周开始灌胃,实验组给溶髓方汤剂,病理模型组和空白对照组分别给生理盐水,每日一次,灌1个月,分别于手术后第10周、18周、36周对三组动物分别实施过度麻醉处死,完整取下包含上下椎体的椎间盘。对取下的颈椎标本做矢状位切片,小心分离软骨终板和椎间盘。按Thompson椎间盘退变病理分级标准[1]对颈椎间盘进行分级评定。将软骨终板石蜡包埋,切片。做HE染色和Tunnel染色,计数椎间盘软骨终板细胞凋亡数量,评估软骨终板退变状况。   结果:(1)椎间盘退变的组织学表现。10周时,空白对照组大鼠椎间盘组织结构基本正常。而病理模型组和实验组大鼠椎间盘均出现轻度退变表现,差别不明显。18周后空白组大鼠椎间盘出现轻微退变,但不明显,髓核皱缩,纤维环出现裂隙。病理模型组大鼠椎间盘退变明显,实验组大鼠椎间盘退变有所恢复,组织结构基本正常,与空白组无明显差异。36周后,空白对照组大鼠颈椎间盘与18周相比出现显著退变,且与病理模型组差异不大,而实验组椎间盘有轻度退变。(2)HE染色观察颈椎间盘细胞凋亡状况。术后10周病理模型组和实验组终板结构都出现局部消失,细胞密度降低,可见散在分布的凋亡软骨细胞和凋亡小体。术后18周病理模型组出现显著退变,实验组退变有所恢复,术后36周空白对照组和病理模型组退变均比较明显,椎间盘完全钙化,终板基本消失,实验组出现轻度退变。(3)TUNEL染色比较各组软骨终板内细胞凋亡率(TUNEL阳性细胞率)。软骨终板内的细胞凋亡主要发生在18周以后,在试验中我们可以发现,10周时,空白对照组、病理模型组和实验组软骨终板内凋亡细胞几乎均不可见。而18周时这种情况就发生了变化,空白对照组、病理模型组和实验组出现了明显差别,病理模型组凋亡细胞数目明显增多,空白对照组与实验组凋亡的细胞数量无显著差异。36周情况又有了较大变化,空白对照组和病理模型组凋亡细胞数量都比较多,且没有明显差别,而实验组细胞凋亡数目明显比前两组要少得多。   结论:(1)终板细胞凋亡是椎间盘发生退行性变的重要原因。(2)溶髓方可以延缓椎间盘退变过程,减慢软骨终板细胞的凋亡速度,恢复软骨终板的结构和功能。

溶髓方;椎间盘软骨终板;细胞凋亡;防治作用;退行性变;动物试验

广西中医药大学

硕士

中医骨伤

刘汝专

2013

中文

R285.5;R681.53

60

2013-11-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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