干细胞样骨肉瘤细胞的分选与其生物学特性检测的实验研究
目的:本研究针对骨肉瘤的高复发和转移特性，从普通骨肉瘤细胞株中分离、培养骨肉瘤干细胞，检测骨肉瘤干细胞的生物学特性，为进一步研究骨肉瘤发病机制、早期诊断及靶向治疗提供依据。
方法:从中科院上海细胞库购买骨肉瘤MG-63细胞株，进行大量的增殖培养，采用添加低浓度甲氨蝶呤的无血清培养技术诱导骨肉瘤球体细胞;从细胞的生长曲线，成骨与成脂诱导，流式细胞仪检测其细胞表面标志物来检测其生物学特性。
结果:
(1)骨肉瘤MG-63细胞株传代并大量增殖。
(2)成功从第三代骨肉瘤细胞诱导出干细胞样骨肉瘤球（以下简称M细胞）。
(3)流式细胞术检测M细胞中CD29、90、45的表达，CD29阳性率为99.0％，CD90阳性率为99.6％，CD45阳性率为1.19％。
(4)细胞增殖实验、细胞分化实验及流式细胞检测结果发现M细胞具有较强的侵袭性、增殖能力。
结论:骨肉瘤MG-63细胞在添加细胞因子(EGF、bFGF)及低浓度甲氨蝶呤的无血清培养基中可诱导M细胞，流式细胞术检测发现M细胞具有干细胞的表面标志物(CD45);该M细胞可向成骨细胞、脂肪细胞分化;细胞侵袭实验、细胞增殖实验结果发现该细胞具有较强的侵袭性、增殖能力。上述结果表明本次试验所分离培养的骨肉瘤细胞具有干细胞特性。
骨肉瘤;生物学特性;病理特征;转移机制;侵袭能力
广西中医药大学
硕士
中医骨伤科学
杨渊
2013
中文
R730.2;R738.1
65
2013-11-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）