低相对分子质量硫酸软骨素的制备及性质研究
硫酸软骨素是由D-葡萄糖醛酸与N-乙酰-D-氨基半乳糖交替连结而成的一类酸性糖胺聚糖,具有多种生物活性,且其生物活性随结构的变化而变化。多糖相对分子质量的大小对其生物活性的发挥有着重要影响,低相对分子质量硫酸软骨素有更高的生物利用度。 本论文主要研究内容:采用不同工艺对鸡硫酸软骨素进行降解研究,并对所制备的低相对分子质量硫酸软骨素进行主要成分分析、结构表征及活性研究,以期为低相对分子质量硫酸软骨素的开发利用和生物活性研究提供一定的理论依据。 1、采用不同方法对鸡硫酸软骨素进行降解研究,确定过氧化氢+乙酸铜+抗坏血酸体系为最佳降解方法。以溶液pH、降解温度、过氧化氢添加浓度及乙酸铜添加量为主要因素进行单因素试验,并在此基础上根据Box-Behnken中心组合原理,做4因素3水平的响应面设计优化试验,采用Design-expert7.0软件进行数据分析,得到二次回归方程,最终确定低相对分子质量硫酸软骨素最佳制备工艺参数为:体系中Cu2+含量1 mmol/L、溶液pH=6.00、降解温度63℃、体系中过氧化氢浓度4.8%。 2、对所制备的低相对分子质量硫酸软骨素进行结构表征及基本物化性质研究。高效凝胶过滤色谱法测定结果表明,经自由基系降解,硫酸软骨素相对重均分子量从63623降到6520。统计学分析,降解前后,总糖含量差异显著,葡萄糖醛酸、氨基己糖、总硫酸根的含量差异不显著。形貌及螺旋结构分析结果表明,低相对分子质量硫酸软骨素结构不发生变化,在水溶液中以三股螺旋链的形式存在,呈棒状结构,无规则聚集,但羟自由基降解造会成硫酸软骨素螺旋链部分解体,空间不对称性降低。红外光谱和元素分析结果共同表明,低相对分子质量硫酸软骨素中硫酸基团、羧酸基团含量及基本单糖结构不变,表明羟自由基降解会造成硫酸软骨素中二糖之间相互连接的β-1,4糖苷键断裂,而对葡萄糖醛酸与氨基半乳糖之间相互连接的β-1,3糖苷键无影响。热分析研究发现低相对分子质量硫酸软骨素热分解特性相似。 3、低相对分子质量硫酸软骨素进行体外抗氧化及体外模拟降解试验。结果表明,低相对分子质量硫酸软骨自由基清除能力及金属离子螯合能力均好于未降解硫酸软骨素,其中对羟自由基、超氧阴离子自由基及亚硝酸根离子清除效果均较好,对DPPH自由基清除能力较弱。低相对分子质量硫酸软骨体内降解过程基本相似,均在进入模拟胃液和肠液的前30 min降解率快速上升。
低相对分子质量硫酸软骨素;制备工艺;结构表征;生物活性;螯合能力;降解机制
西南科技大学
硕士
应用化学
熊双丽
2013
中文
O636.1
83
2013-10-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)