化学发光微粒子免疫法监测肝移植受者他克莫司全血浓度的系列研究
目的:探讨化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)测定全血他克莫司浓度的可行性和影响因素，建立室内质量控制标准;研究肝移植受者术后不同时间他克莫司稳态谷浓度(C0)参考值范围的合理性;研究肝移植术后一个月内临床因素对他克莫司清除率（RC）的影响，为临床制定个体化用药方案提供参考。
方法:
1考察CMIA法监测他克莫司全血浓度的精密度与回收率。汇总2011年11月至2012年11月随行质控数据，绘制Levey-Jennings质控图。
考察他克莫司全血样本在5℃、20℃、26℃下分别保存1d、3d对测定结果的影响;考察他克莫司从全血提取后，置于TransplantPretreatmentTube中不同时间以及使用AXSYM样品杯与TransplantPretreatmentTube对测定结果的影响。
2回顾性分析2011年11月至2012年4月74例肝移植受者资料，结合305份他克莫司C0值结果、肝移植受者的临床表现及生化指标，考察现行他克莫司C0参考值范围。
32011年11月至2012年11月在我院进行他克莫司监测的肝移植受者82例。其中，移植术后≤1个月，术后采用“他克莫司+吗替麦考酚酯+泼尼松”三联免疫抑制方案的有34例，监测他克莫司C0157次，分别考察其白蛋白(ALB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、葡萄糖(GLU)、肌酐(Cr)、白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)、红细胞压积(HCT)与他克莫司RC间相关性。82例肝移植受者中有9例发生腹泻，经病历查询，汇总其腹泻发生与持续的时间、他克莫司剂量(D)及C0，计算RC值并分析腹泻对他克莫司RC的影响。
结果:
1采用CMIA法测定3种浓度他克莫司质控品(Level1、Level2、Level3标示浓度分别为4.2ng/ml、8.7ng/ml、18.2ng/ml)的日内与日间精密度，结果分别为为:0.60％、0.22％、0.09％，1.38％、0.47％、0.10％;日内与日间回收率分别为:104.38％、103.85％、103.11％，102.86％、102.14％、103.11％;符合《中国药典》生物样品检测RSD＜15％，方法回收率在85～115％之间的规定。共测定随行质控91次，均在控制范围内。Level1、Level3质控图状态良好，Level2质控图因产品批号差异，状态不佳。
11例临床送检血样在5℃下保存1d和3d、20℃下保存1d和3d、26℃下保存1d与对照组测定结果相比，差异无统计学意义(P＞0.05);26℃下保存3d与对照组测定结果相比，差异有统计学意义(P＜0.05)。
他克莫司从全血提取后置于TransplantPretreatmentTube中0.5h测定与对照组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）;提取药物置于TransplantPretreatmentTube中3h测定，结果高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。提取药物置于TransplantPretreatmentTube与AXSYM样品杯的测定结果相比，差异无统计学意义(P＞0.05)。
2对74例肝移植受者监测他克莫司C0305次，移植术后≤3个月与移植术后＞3个月，他克莫司C0分别为7.0±3.6ng/mL、5.5±2.3ng/mL。移植术后共发生肝肾毒性54例次，发生率随C0升高而升高，发生排斥反应4例次;按照实验室原来MEIA法C0参考值范围，移植术后≤3个月和移植术后＞3个月分别有16.5％和51.9％的C0在参考值范围内，建议将C0参考值范围调整为:肝移植术后≤3个月维持在8～15ng/ml;肝移植术后＞3个月维持在5～10ng/ml。
3对34例移植术后≤1个月的肝移植受者监测他克莫司C0157次，其C0、D、RC分别为7.2±2.7ng/ml、0.058±0.014mg/kg、9.2±4.2L/kg;ALB、ALT、TBIL、GLU、Cr、WBC、RBC、PLT、HCT平均值分别为:38.3g/L、147U/L、52umol/L、6.5mmol/L、74umol/L、9.1×10/L、3.4×109/L、131×109/L、32.1％;其中ALT、TBIL、GLU高于正常值范围，RBC、HCT低于正常值范围，其余指标在正常范围内。将各指标与RC进行Pearson相关性分析，按α=0.05水准，TBIL、GLU、HCT与RC存在负相关性，相关系数r分别为0.357、0.366、0.349。
82例肝移植受者中9例发生腹泻，腹泻发生率为11.0％，其中5例(55.6％)RC降低，平均降幅47％，3例因腹泻调整了他克莫司剂量。
结论:
1CMIA测定他克莫司全血浓度精密度高、特异性好，适合临床常规监测。实验室应建立室内质量控制标准，确保监测结果准确、可靠。
他克莫司全血样品在5℃及20℃保存1d至3d、26℃保存1d对监测结果无影响;在26℃保存3d后监测结果不准确。设备出现故障时，如他克莫司自全血提取后置于TransplantPretreatmentTube不超过30min，可重复测定;超过3h必须重新处理血样。将提取药物置于TransplantPretreatmentTube或是AXSYM样品杯上机测定均可，使用AXSYM样品杯更节约成本。
2CMIA法监测他克莫司的C0参考值范围:肝移植术后≤3个月，维持在8～15ng/ml;肝移植术后＞3个月，维持在5～10ng/ml。
3移植术后1个月内的肝移植受者，TBIL、GLU、HCT与他克莫司RC存在负相关性。发生腹泻时，他克莫司RC降低、C0升高的几率较大，但调整用药剂量时仍需谨慎，防止减小剂量后排斥反应的发生。
化学发光微粒子;免疫分析法;他克莫司;肝移植受者;清除率;稳态谷浓度;参考值范围
河北医科大学
硕士
药剂学
张翠欣
2013
中文
R657.3
59
2013-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）