失神经对大鼠牙周组织缺损愈合的影响及机制初探
背景和目的:
牙周病是口腔中两大主要疾病之一，其发病率较高并且较难控制，也是牙齿缺失的主要原因。特征性表现为牙龈的炎症、牙周袋的形成、牙槽骨出现不同程度的吸收以造成牙齿松动脱落。目前所追求的牙周病治疗最终目的不仅是去除病因，阻止疾病的进展，更重要的是如何使病变破坏的牙周组织再生并行使其功能，纵然目前对牙周组织再生的研究较为热门，但是仍未达到满意的效果。
近年来在牙周组织再生领域的研究中，针对组织工程中材料支架，种子细胞和生长因子的研究较为热门，同时基因工程与组织工程的结合性研究也开始渐渐的深入，但是其研究所取得的结果并未达到我们所追求的牙周组织再生目标。牙周组织再生过程中细胞分泌的生长因子对周围基质的合成固然重要，但是组织基质的神经化，组织基质的感觉神经化在维持其功能中的作用是不可忽视的，神经的支配和调节作用在牙周组织再生过程中的作用一直未被重视。神经系统在牙周组织中具有传导疼痛和感受压力的作用，但是除了其基本的神经传导作用以外，其分泌的各种功能性神经肽对维持牙周组织微环境的动态平衡也具有不可忽视的意义。目前通过体外的相关研究证实神经系统可以通过介导成骨细胞和破骨细胞的活性从而参与调节骨代谢，在骨的修复改建过程中起着关键性的作用[1,2]。神经系统能够在不同水平上参与骨创伤的愈合修复和重塑，感觉神经能够通过成骨细胞细胞膜上的神经递质受体作用，直接调节成骨细胞的生物学活性和免疫应答反应，也可以间接调控成骨细胞的生物学活性从而影响骨创伤愈合速度和质量。同时在体外实验研究中部分神经肽物质的促成骨作用已经得到证实[3]。降钙素基因相关肽(calcitoningenerelatedpeptideCGRP)是骨组织中分布较为广泛的一种感觉性功能神经肽，最早为Hukkanen在大鼠骨折模型实验过程中发现的，其发现在新生骨组织中有CGRP免疫组织染色阳性纤维的长入[4]，随后CGRP的作用及机制成为研究骨折愈合改建的热点，同时在消化系统、心血管系统和疼痛传导机制的调控中成为较为热门的研究课题。
相关研究显示CGRP的阳性神经纤维在颌骨及其骨膜中均有分布，推测其参与了生长发育期的颌骨生长形成和后期的修复改建过程[5,6]。近期研究显示，CGRP在牙周组织中也有较为广泛的分布，通过免疫组织化染色发现，CGRP主要分布于牙周膜的成纤维细胞以及牙槽骨中的血管周围，说明其在牙周组织的稳态维持和生理功能过程中可能具有一定的调控意义，尤其在牙槽骨的改建过程中。在口腔外科的研究中，针对CGRP在骨折愈合的研究较为广泛，研究显示CGRP可以促进下颌骨骨折的愈合[7]。在正畸医学研究中，CGRP对正畸牙齿移动过程中牙槽骨的改建和重塑具有一定的调节作用。鉴于以上实验和理论基础，我们推测CGRP在牙周组织再生过程中也可能具不可忽视的意义。为了探讨CGRP在牙周组织再生过程中的作用，本实验设计了一种切断或保留大鼠下牙槽神经伴牙周缺损的动物模型，并在此基础上研究CGRP在牙周组织再生过程中的作用。
方法:
1、失下牙槽神经后大鼠牙周组织中CGRP的表达变化实验研究
建立切断大鼠下牙槽神经的动物模型，左侧离断神经为实验组，对侧保留神经为对照组，分为五组即3天、7天、14天、21天、28天。采用免疫组织化学染色的方法检测大鼠牙周组织中CGRP以及SP的表达变化
2、失下牙槽神经对大鼠牙周组织缺损愈合影响的组织学观察
通过口外入路建立切断大鼠下牙槽神经伴牙周缺损模型，左侧切断大鼠下牙槽神经伴牙周缺损为实验组，对侧保留神经仅做牙周缺损为对照组。分为五组即1周、2周、4周、6周和8周。利用HE，Masson染色观察研究失神经后牙周组织缺损愈合的修复效果，通过免疫组织化学染色的方法观察CGRP和OPG/RANKL的表达变化。
结果:
1、失下牙槽神经后大鼠牙周组织中CGRP的表达变化实验研究
免疫组织化学结果显示失神经后牙周组织中的CGRP和SP呈现先降低后上升至正常水平的趋势。利用SPSS17.0统计软件分析显示3天、7天和14天组与对照组有统计学差异(P＜0.05)。
2、失下牙槽神经对大鼠牙周组织缺损愈合影响的组织学观察
通过HE、masson染色以及免疫组织化学染色等检测方法以及利用SPSS17.0统计软件分析显示牙周组织再生过程中实验组新生骨的矿化程度比对照组低，具有统计学差异(P＜0.05)，实验组与对照组新生骨组织中CGRP的表达具有统计学差异（P＜0.05）。缺损区OPG/RANKL值变化与CGRP变化趋势相同。
结论:
1、失下牙槽神经支配，牙周组织中的神经肽CGRP的和SP的表达会出现变化
2、失下牙槽神经支配，牙周组织缺损愈合过程中新生骨组织的矿化程度降低
牙周病;下牙槽神经;降钙素基因相关肽;P物质;牙周组织再生
山东大学
硕士
口腔基础医学
李纾
2013
中文
R781.4;R339.37
51
2013-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）