PEG修饰对脂质纳米载体胃肠道转运的影响
固体脂质纳米粒(SLN)，是继传统的乳剂、脂质体、聚合物微粒后近年来研究比较活跃的一种缓控释靶向胶粒给药系统。目前，SLN的口服给药方式因方便、快捷、患者适应性强等特点，已成为研究热点。但是，SLN等微粒给药系统的口服吸收受胃肠道粘膜屏障以及生理环境的影响很大。例如，口服给药后，由于胃肠道存在高度粘弹性、粘附性的粘膜层，大部分的外界粒子会以不同的方式被清除，从而无法穿透黏膜进入体循环。因此，通过对粒子的表面进行修饰，设计粘膜渗透粒子具有非常实际的作用。
研究利用单甘脂作为脂质材料，分别以异硫氰基荧光素(ODA-FITC)和阿霉素(DOX)作为荧光标记物以及模型药物，用PEG2000-SA修饰以提供亲水性基团，以0.1％的泊洛沙姆溶液作为水相，将脂质材料溶于有机溶剂作为油相，采用水性溶剂扩散法制备得到固体脂质纳米粒。通过表面元素分析发现，PEG修饰后，粒子表面的C/O比例发生变化，说明修饰后粒子表面存在PEG链。通过测定接触角确认，经过PEG修饰后粒子的亲水性增加，接触角由原先的45.3°降低到36.5°。由粒径电位测定仪测得，随着PEG修饰比例的增加，粒径、电位绝对值有不同程度的降低。体内稳定性研究结果显示，PEG修饰可以显著性地改善粒子在模拟体液中的稳定性。此外，通过测定载药粒子的包封率、载药量以及体外释放，发现PEG修饰并不影响粒子的包封率以及体外释放行为。
利用人克隆结肠癌细胞Caco-2及人结肠腺癌细胞HT29作为体外跨肠道粘膜转运的评价模型细胞，研究PEG修饰SLN(pSLN)的跨膜转运能力。HT29细胞具有分泌粘液的性质，将其与Caco-2细胞共同培养，得到的共培养细胞单层表面附有粘液层，能更好的模拟人体的自然生理条件。研究结果显示，在Caco-2细胞单层中，SLN的转运速度最快，PEG的修饰会使粒子的转运有不同程度的降低。然而，粘液分泌细胞HT29的加入能改变转运的形势，HT29细胞不仅能增加粘液层，还能使载体的旁路转运增加。pSLN的转运速率随着HT29细胞比例的增加而增加，说明粘液层对pSLN的阻碍作用很小，而且HT29细胞的加入使pSLN载体的旁路途径转运量增加。但HT29对SLN的影响则与前者不同，在90/10比例时，SLN的转运增加，说明旁路途径的增强作用比粘液层的抑制作用强。75/25比例时，粒子的转运速率降低了，即粘液层的抑制作用超过旁路的增强作用，说明适当的PEG修饰对促进药物在小肠粘膜的转运非常重要。
以SD大鼠作为模型动物，首先用外翻肠囊法考察SLN及pSLN的胃肠道转运吸收情况。数据显示，PEG修饰可显著性增加SLN通过大鼠不同肠段的转运量，结果与Caco-2/HT29(75/25)单层模型具有一致性，因此也说明了HT29与Caco-2细胞共同培养得到的细胞单层能更好的模拟体内条件。其次，采用结扎肠循环模型考察SLN及pSLN的体内肠道吸收情况，以倒置双光子共聚焦显微镜观察大鼠肠道切片，所得结果与上述结论一致，pSLN能比较顺利的穿过肠粘膜屏障而SLN却被粘液层阻挡。SD大鼠灌胃实验证明，PEG修饰载药固体脂质纳米粒与游离药物相比，体内平均滞留时间由5.25 h增加到33.02 h，相对生物利用度增加了7.52倍，PEG修饰延长了药物的体内滞留时间，降低了消除速率，有效的提高了口服制剂的肠道吸收，更有利于药物药效的发挥。
固体脂质纳米粒;聚乙二醇;阿霉素;口服给药系统;Caco-2细胞;HT29细胞
浙江大学
硕士
药剂学
袁弘
2013
中文
R979.14;R944.9
80
2013-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）