MOV10抑制LINE-1转座活性机制初探
LINE-1(long interspersed element-1)是机体内唯一具有自主转座活性的反转座子。其转座过程经过以其转录产物RNA为模版的、称为靶序列引发反转录(Target-primed reverse transcription，TPRT)的机制完成，与反转录病毒的生活周期极为相似。LINE-1在基因组中所占比例较高(17％)，其转座行为的发生，在给基因组带来进化的同时，也可能引发基因疾病。对LINE-1的研究，一方面可以深层次探究生命的奥秘，丰富人类对于转座子的认识：另一方面，可以将其作为研究反转录病毒的参照，探索细胞的抗病毒机制，为发现抗反转录病毒或治疗由转座子移动引起的遗传病提供新的思路。
MOV10是新发现的一种具有广谱抗反转录病毒潜能的因子。已知它可以抑制包括HIV-1在内的诸多反转录病毒的复制过程，但具体作用机制还不清楚。此外，它也是P-bodies的附加组分，可以介导由miRNA引发的mRNA降解，在RNA干扰途径中发挥着巨大作用。
麦吉尔大学梁臣教授实验室前期的研究结果显示：MOV10可以抑制LINE-1的转座活性。本文以此为基础，在本室建立起LINE-1转座活性检测平台，使用MOV10及其两种突变体对其进行验证，确证所建检测系统可准确指示LINE-1的转座活性：模序Ⅰ突变的MOV10(KR)抑制LINE-1转座活性的能力几乎消失。基于这一实验现象，本文对其分子机制进行了初步探索：首先构建含Myc标签的ORF1p真核表达质粒，通过免疫共沉淀实验证明MOV10与ORF1p间存在相互作用，KR突变后相互作用依然存在。因ORF1p是一种RNA结合蛋白，推测RNA在两者的相互作用中发挥重要作用。进一步实验使用RNaseA消化细胞中的RNA，MOV10及其突变体MOV10(KR)与ORF1p之间的相互作用也随之消失。
本文研究结果表明：MOV10可以抑制LINE-1的转座活性，MOV10及其突变体MOV10(KR)与LINE-1编码的ORF1p间存在相互作用，这一相互作用需要RNA介导。本文研究结果推进了对MOV10抑制LINE-1转座活性的认识，为揭示MOV10抑制反转录病毒复制及全面认知机体维持基因组稳定性的机制提供了线索。
蛋白相互作用;转座活性机制;抗病毒机制;遗传病
南开大学
硕士
微生物学
梁臣
2012
中文
R596
71
2013-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）