兔VX-2口底癌动物模型建立的实验研究
目的：建立适合局部治疗研究用的兔VX-2口底癌动物模型，并对其生物学特性进行研究。同时，探讨肿瘤模型影像学及病理学表现，为口底癌治疗提供研究平台。
方法：⑴荷瘤种兔的制作首先对冻存的VX-2瘤组织块进行相应的复苏，然后建立荷瘤种兔以获得实验中需要的肿瘤组织块。⑵兔口底恶性肿瘤模型的制作30只纯种的新西兰大白兔，雌雄不限，兔龄2～3月，体重1.5～2.0kg，随机分成2组(每组15只)，均在标准实验室饲养；从荷瘤种兔身上剥离VX-2肿瘤组织块，制备成移植所用的一定大小的VX-2肿瘤组织块及细胞悬液，分别采用VX-2瘤块组织植入法(A组)及改良瘤细胞悬液注射法(B组)接种于实验兔的口底正中区以制作兔VX-2口底恶性肿瘤模型。⑶观察指标及统计数据观察记录实验兔的术后清醒时间、并发症情况、实验兔的精神、食欲、活动有无异常；分别于实验兔接种术后第1周、第2周、第3周、第4周时观察瘤灶的大体表现，且分别行颅脑及颈部的CT及MR扫描检查，检查口底部位有无肿瘤形成及颈部有无肿大及转移的淋巴结，记录肉眼及CT及MR扫描检查三种手段所发现的肿瘤的大小、数目、部位，记录CT及MR扫描检查发现的转移肿大淋巴结的数目、大小和部位，统计实验兔的成瘤率；统计实验兔的颈部淋巴结转移率及肺转移率；计算肿瘤的生长率，对两组实验兔成瘤率及颈部淋巴结转移率及肺转移率进行比较；观察实验动物自然生存情况；死亡后尸检；肿瘤组织、转移淋巴结及器官经10％福尔马林固定后行病理检查。
结果：26只实验兔发现瘤灶，总成瘤率86.67％(26/30)，其中组织块植入法(A组)成功率为80.00％(12/15)，改良瘤细胞悬液注射法(B组)成功率为93.33％(14/15)，两组接种成功率无显著差异(P>0.05)；本实验中26只成瘤兔中20只发现颈部转移淋巴结，颈淋巴结总转移率为76.92％(20/26)，10只发生肺转移，总肺转移率为38.46％(10/26)；其中改良瘤细胞悬液注入组的局部淋巴结转移率为92.86％(13/14)，肺转移率为57.14％(8/14)，均为最高；瘤组织块植入组的局部淋巴结转移率为58.33％(7/12)，肺转移率为16.67％(2/12)；两组实验兔的成瘤率、颈部淋巴结转移率、肺转移率相比差异均无统计学意义。整个模型建立过程操作步骤简单，成瘤率高。A、B两组实验兔的饮食、精神、活动等一般生物性特点无明显差异。观察所建成的兔口底癌动物模型发现VX-2肿瘤经历了3个主要阶段：肿瘤迅速增长阶段、肿瘤中心坏死阶段、表面破溃阶段，平均生存期约为6～8周。瘤体和淋巴结标本病理切片HE染色镜下观察，均为中分化鳞癌，证实成瘤及出现淋巴结转移。
结论：采用组织块移植法及改良细胞悬液注射法两种方法制作兔VX-2口底癌动物模型，其成瘤率、颈部淋巴结转移率、肺转移率、生长率、肿瘤性质、肿瘤生长特点等比较均无统计学意义。采用CT及MR两种影像学检查手段对瘤灶进行动态的检测、评价，可以更加及时、准确地观察瘤灶的发生、发展等影像学改变。通过上述两种操作方法制作的兔口底部鳞癌模型具有操作简单、耗时短、重复性好、生物学性质稳定、成瘤率高、转移率高等多种特点，组织学特征符合鳞状细胞癌表现，生物学特性与人口底鳞状细胞癌相似，为口底癌的生物学、治疗学、药代动力学等实验研究提供了一个良好的较大型的动物模型。
口腔肿瘤;医学实验;动物模型;荷瘤种兔
泰山医学院
硕士
老年医学
李晓光
2012
中文
R739.8;R73-354
59
2013-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）