IGT患者维生素D、VDR基因FokI多态性与胰岛素抵抗的相关性研究
目的：本实验为了观察泰安及周边地区汉族人群中是否存在VDR基因FokI等位基因多态性，检测IGT人群血清25-OH-VD3水平及VDR基因FokI等位基因多态性，并探讨IGT人群血清25-OH-VD3水平与胰岛素抵抗的关系，维生素D受体基因FokI多态性与胰岛素抵抗相关性以及了解维生素D在IGT发生中的作用和意义。本实验从分子生物学角度探索IGT的发病机制，为深入研究IGT的发病机制、为临床研究及预防IGT发展为2型糖尿病提供一定的科学理论指导。
方法：采用病例-对照研究方法，在泰安中心医院就诊的患者中随机选取无亲缘关系的汉族IGT患者94例、单位及社区健康人54例作为研究对象。运用多聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RLFP)技术方法检测维生素D受体基因FokI多态性，对所有样本进行全血DNA提取，PCR扩增VDR基因，VDR基因FokI限制性内切酶酶切扩增产物，在凝胶成像系统下检测基因型，计算并比较IGT患者和正常对照组基因型频率、等位基因分布频率；同时测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)，计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)，以HOMA-IR评价机体的胰岛素抵抗程度；应用25-OH-VD3 ELISA试剂盒测定以上所有样本的血清25-OH-VD3的水平，最后分析两组临床资料，用Pearson相关分析25-OH-VD3与HOMA-IR的关系，试图通过等位基因分布频率、血清25-OH-VD3水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)等指标来阐明IGT患者的维生素D水平、维生素D受体基因FokI多态性与胰岛素抵抗状况。所有数据以SPSS13.0软件进行统计分析。
结果：⑴血清25-OH-VD3水平<30ng/ml者占全部观察对象的63.8％；IGT组与健康对照组相比，血清25-OH-VD3水平低(22.05±2.37 vs32.04±2.64ng/ml)P<0.05，差异有统计学意义；作Pearson相关分析示血清25-OH-VD3水平与HOMA-IR呈负相关(r=-0.813 P<0.01)、与BMI呈负相关(r=0.324 P=0.026)、与WL呈负相关(r=-0.440P=0.002)。IGT组与健康对照组相比，BMI增高(26.07±2.50 vs22.82±1.59kg/m2)、FINS水平增高(16.32±7.29 vs8.11±4.06uIu/ml)、HOMA-IR增高(4.14±1.88 vs2.04±1.07)、TG增高(1.93±0.18 vs1.474±0.21)、TC增高(5.46±0.72 vs5.25±0.31)、LDL-C增高(3.14±0.94 vs2.84±0.24)、PBG增高(8.99±0.85 vs7.36±0.23)、HbAlc增高(5.89±0.35 vs5.04±0.32)P<0.05，差异有统计学意义。⑵本试验样本VDR FokI位点基因型符合Hardy-Weinberg遗传平衡。VDR基因FokI多态性在IGT组及健康对照组中均能检测到，采用PCR-RFLP技术检测泰安及周边地区汉族人群VDR基因FokI多态性，共检出VDR FokI位点三种基因型分别为FF、Ff、ff。IGT组与正常对照组相比，“f”等位基因频率升高(46.8％ vs25.9％P<0.05)，“FF、Ff、ff”基因型频率同正常对照组相比(FF：30.9％ vs57.4％；Ff：46.9％ vs33.3％；ff：22.3％ vs9.3％)P<0.05，差异有统计学意义。用优势比OR值计算FokI基因型在IGT患者中的患病相对危险度，发现携带Ff基因型个体发生IGT的危险性是FF基因型个体的2.613倍(OR=2.613，95％CI=1.239-5.512，P=0.018)，携带ff基因型的个体患IGT的风险是FF基因型个体的4.49倍，(OR=4.49，95％CI=1.496-13.473，P=0.01)，携带“f”等位基因型患IGT的危险性增加，是携带“F”等位基因型人群IGT的发病风险的2.465倍(OR=2.465，95％CI=1.188-5.116，P=0.023)；Ff、ff基因型与FF型相比HOMA-IR高(3.91±0.46、7.05±2.37 vs2.46±0.37)P<0.05差异有统计学意义；VDR基因FokI位点ff基因型患者较其它两组胰岛素抵抗更加明显(P<0.01)。
结论：①维生素D不足在人群中较为普遍。②血清25-OH-VD3水平与胰岛素抵抗呈负相关。③VDR基因FokI多态性在泰安及周边地区汉族人群中存在，VDR基因FokI可能是泰安及周边地区汉族人群IGT的易感基因。VDR基因FokI位点f等位基因与胰岛素抵抗明显相关，说明维生素D及维生素D受体基因FokI多态性可能对IGT人群的胰岛素抵抗起一定的作用，VDR基因FokI位点携带“f”等位基因者更易发生胰岛素抵抗。
2型糖尿病;胰岛素抵抗;基因表达;细胞病理学
泰山医学院
硕士
内科学
亓文波
2012
中文
R587.102;R361.3
50
2013-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）