葛根素O/W、W/O型微乳口服吸收机理的初步研究
一、目的
葛根素(Puerarin，Pue)是从豆科植物野葛或甘葛藤中提取出的一种异黄酮类化合物，临床上广泛应用于心脑血管疾病的治疗。由于葛根素在水中的溶解度小，口服生物利用度低等原因，使其临床应用受到了一定的限制。微乳(Microemulsion，ME)能显著提高水难溶性药物的口服生物利用度，是继脂质体、固体脂质纳米粒等发展起来的含脂质新型递药系统。微乳主要分为O/W和W/O型，具有热力学稳定、粒径小且渗透力强等优点，同时可避免胃肠道中的酶降解而具有很好的应用前景。现有研究报道，O/W和W/O型口服微乳能不同程度的提高药物的生物利用度，但其口服吸收机制尚未阐明。本文以葛根素为模型药物制备了葛根素O/W-ME、W/O-ME，拟通过乳糜微粒流阻滞法阻滞大鼠淋巴的转运，以考察两种微乳口服后经淋巴途径转运的比例，探讨微乳口服吸收转运的通道，并通过大鼠在体原位胃灌注和在体单向肠灌流实验分别考察两种类型的微乳在胃和肠道中的吸收情况及其差异，为阐述口服微乳吸收机理提供理论依据，也为微乳制剂的设计提供参考。
二、方法与结果
1.葛根素O/W、W/O型微乳经淋巴途径转运的研究
通过乳糜微粒流阻滞技术将大鼠的淋巴途径阻滞后，对葛根素O/W-ME、W/O-ME经淋巴转运的情况进行了考察。结果表明，葛根素O/W-ME、W/O-ME和混悬液在大鼠淋巴阻断组和淋巴未阻断组的Cmax分别为0.486±0.098和1.029±0.208、0.618±0.102和1.966±0.362、0.408±0.048和0.740±0.099，AUC0→∞分别为4.008±1.407和6.998±0.683、4.373±0.326和7.669±1.866、3.679±2.871和3.939±0.980。由各组的AUC0→∞分别计算出其经淋巴转运的比例，其中葛根素O/W-ME、W/O-ME经淋巴途径转运的比例分别为43.0％和42.7％，而混悬液组只有6.6％(P＜0.05)，结果表明葛根素W/O-ME、O/W-ME均能显著地提高葛根素经淋巴途径转运的比例，证实了微乳促进药物经淋巴转运是微乳提高药物口服生物利用度的重要原因之一。
2.葛根素O/W、W/O型微乳的大鼠在体胃吸收研究
建立了HPLC法测定胃灌注液中葛根素浓度的测定方法，结果提示胃灌流液不干扰葛根素的测定，该方法专属性好，线性关系、精密度、回收率和稳定性均符合生物样品的分析要求。采用大鼠在体原位胃灌注实验考察了葛根素W/O-ME、O/W-ME在胃中的吸收情况，结果表明葛根素W/O-ME、O/W-ME在胃中2h的吸收百分率大于葛根素混悬液组(P＜0.05)，W/O-ME与O/W-ME相比，有促进葛根素在胃中的吸收趋势，但无统计学意义(P＞0.05)。结果表明葛根素微乳可增加葛根素在胃中的吸收，且由于W/O-ME的助表面活性剂为乙醇，因此W/O-ME更能促进葛根素在胃中的吸收。
3.葛根素O/W、W/O型微乳的大鼠在体肠吸收研究
通过绘制伪三元相图制备了不同碳链长度油相的葛根素W/O-ME，并对其进行了初步质量评价，筛选出了三种不同碳链长度油相的W/O-ME: EO-W/O-ME、IPM-W/O-ME、和乙酸乙酯-W/O-ME。采用大鼠在体单向肠灌流法考察了葛根素W/O-ME、O/W-ME在大鼠体内的肠吸收特征，并分别对各自的吸收机制进行了初步探讨，其中重点考察了含不同碳链长度油相的W/O-ME在不同肠段的吸收特征。研究结果显示，不同葛根素制剂在肠道中的Ka和Papp值大小约为:葛根素W/O-ME＞O/W-ME＞混悬液(P＜0.05)，其中不同碳链长度油相的葛根素W/O-ME吸收表现为吸收率与油相碳链长度呈正相关关系(EO-W/O-ME＞IPM-W/O-ME＞乙酸乙酯-W/O-ME)(P＜0.05)，结果提示W/O-ME与O/W-ME相比更能促进葛根素的肠道吸收。
三、结论
葛根素W/O-ME、O/W-ME与口服混悬液组相比，微乳能增加葛根素经淋巴转运的比例，提高葛根素的口服生物利用度;同时微乳还增加了葛根素在胃、肠道中的吸收，其中W/O-ME更能促进葛根素在胃、肠道中的吸收，且W/O-ME肠吸收与其油相的碳链长度有关，在一定范围内，碳链越长其肠吸收越好。本文对口服微乳经胃肠道的吸收转运机制进行了初步探讨，为微乳剂型设计提供了理论依据，有关微乳在胃肠道的具体释药机理尚待进一步研究。
葛根素;微乳制剂;淋巴转运;吸收机理
中南大学
硕士
药剂学
向大雄
2012
中文
R943
93
2012-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）