云南烤烟GC-MS指纹图谱的建立和应用及HPLC指纹图谱解析研究
对烟草进行科学合理的品质识别和质量分类，对于打叶配方的稳定性和卷烟品牌的建设具有十分重要的指导意义。本实验以云南省12个典型产区不同等级和不同模块配方的烟叶为研究对象，在分析烤烟香气质特征的基础上，建立指纹图谱数据库及其规程，探索以指纹图谱技术判别烤烟质量的方法。研究目的：(1)分析云南典型产区烤烟的香气成分；(2)建立烟叶香气质指纹图谱数据库及规程；(3)研究应用GC-MS指纹图谱进行烟叶质量分类的方法；(4)对烟叶HPLC指纹图谱特征峰进行有机质谱解析。得到相应结果如下：
1、以同时蒸馏萃取结合气质联用分析云南典型产区烟叶中的挥发性和半挥发性成分，得到了丰富的香气成分，其中以醇类、醛类、酮类占多数，而酸类、酚类及酯类的种类和量偏少。在众多的香气成分中新植二烯的含量最高，它在各样品中所占峰面积比(Area%)平均达50%左右。峰面积比在0.5以上的香气成分还有糠醛、巨豆三烯酮、西柏三烯二醇、烟碱、茄酮、β-大马酮、法尼基丙酮、香叶基丙酮等。
2、采用GC-MS手段建立起云南典型产区烤烟的香气质指纹图谱规程，包括样品的前处理和气质条件的优化。结果表明，分别以二氯甲烷和丙酸苯乙酯为萃取剂和内标物，采用同时蒸馏萃取法处理烟样和气质联用仪检测，获取指纹图谱的方法科学可靠。(1)精密度，相对保留时间的RSD均小于0.1%，最大峰的相对峰面积RSD为6.68%，其余峰的RSD均小于5%。(2)稳定性，参照峰的保留时间处于25.52min～25.55min之间，其峰面积比在10.59%～12.03%之间。最大峰的相对峰面积的RSD为9.13%，其余各峰的RSD均小于5.3%。相对保留时间的RSD均在0.09%以内。(3)重现性，各峰相对保留时间RSD均小于0.09%，各样品指纹图谱与参照指纹图谱的夹角余弦相似度均在0.9992以上。
3、建立了各批次样品的共有峰数据库，2009年C3F、B2F、X2F等级烟叶共有指纹峰分别为55个、52个和57个；2010年C3F、B2F、X2F等级烟叶的共有指纹峰个数依次为53、53和60。同时利用分时软件建立了各批次样品的分时数据库，得到了各样品3min～6min、6min～9min，63min～66min共21个分时峰。
4、在分时数据库的基础上，进行主成分分析和聚类分析，对各批次样品做了质量分类。结果表明，2010年C3F、X2F、B2F等级烟叶分别被分为6类、3类和4类；2009年C3F、X2F、B2F等级烟叶分别被分为4类、4类和5类；配方样品被分为3大类。
5、采用(±)ESI-MS/MS方法成功的对云南典型产区烟叶HPLC指纹图谱进行了有机质谱解析。得到了HPLC图谱中响应强度最高的5个峰，依次为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、芦丁、山奈酚-3-芸香糖苷。并且详细的阐述了这几种物质的ESI裂解规律。
烤烟;香气成分;气质指纹图谱;质量分类;有机质谱解析;数据库构建
华中农业大学
硕士
植物营养学
涂书新;何结望
2012
中文
S572
94
2012-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）