鸡体内CAPs及其代谢物残留检测方法与代谢规律的研究
氯霉素类(Chloramphenicols,CAPs)药物作为常见的广谱抗菌药,曾广泛应用于畜禽疾病的控制及治疗。但其存在毒副作用,逐渐被欧盟、美国、中国等国禁止使用(氯霉素,Chloramphenicol,CAP)或限制使用(甲砜霉素,Thiamphenicol,TAP;氟苯尼考,Florfenicol,FF)。因此,为了保障消费者的健康和安全,有必要建立CAPs多残留检测方法并对其代谢规律进行研究。
本文研究了鸡组织(血浆、肌肉)中CAPs及其代谢物(氟苯尼考胺,FlorfenicolAmine,FFA)残留同时检测的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析方法,并进一步探讨了鸡内服CAPs(剂量均为30 mg·kg-1)后,不同时间(0.5、1、2、4、6、8、12、24、36、48、72 h)血浆、肌肉组织中CAPs及其代谢物残留量的变化与代谢规律。
血浆样品用氨化乙酸乙酯提取后,浓缩过膜;肌肉样品在碱性条件下用乙酸乙酯提取后,正己烷去脂,MCX小柱净化,洗脱液浓缩过膜,用高效液相色谱-串联质谱测定。采用电喷雾电离正负离子切换,多反应监测(MRM)模式测定。CAP、TAP、FF和FFA分别以m/z321.1、354.0、355.8和248.0为母离子;以产物离子m/z152.1*和257.2,m/z184.9和289.7*,m/z184.9和335.7*及m/z130.0和230.2*作质谱检测的确证和定量离子(*为定量离子)。三种药物及代谢物在2~100 ng·mL-1的系列浓度范围内均呈良好线性关系,相关系数r均大于0.990。样品中氯霉素的检测限为0.1μg·kg-1,定量限为0.3μg·kg-1;氟苯尼考的检测限为0.2μg·kg-1,定量限为0.5μg·kg-1;甲砜霉素和氟苯尼考胺的检测限为1.0μg·kg-1,定量限为3.0μg·kg-1。三种药物及代谢物在0.2~2.0μg·kg-1的添加浓度范围内,平均回收率范围在79.3%~97.3%之间,相对标准偏差(RSD)均小于10.5%。
用上述建立的检测方法进行了鸡体内CAPs及FFA残留检测,根据检测结果进行代谢规律分析。分别在0.5、1、2、4、6、8、12、24、36、48、72 h取鸡血浆和肌肉样品,并测定这些组织中CAPs和FFA残留量。CAPs在各组织中的消除曲线方程分别为:
C血浆(CAP)=42.01e-0.7555t,C肌肉(CAP)=2.1437e-0.559t,C血浆(TAP)=159.98e-0.2308t,
C肌肉(TAP)=1.8817e-0.2029t,C血浆(FF)=309.99e-0.2038t,C肌肉(FF)=1.9228e-0.2369t。
鸡;氯霉素类药物;代谢物残留;代谢规律
安徽农业大学
硕士
基础兽医学
曾明华
2012
中文
S859.84
49
2012-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)