抗猪圆环病毒药物体外筛选研究
猪圆环病毒感染是由猪圆环病毒引起的一种传染病,猪圆环病毒感染疾病遍及世界各个养猪国家和地区,已然成为严重危害养猪业的重要传染病。虽然有报道猪圆环病毒疫苗研制成功,但是由于上市的时间不长,在临床上使用还不广泛,而且疫苗的效果也有待观察,因此在临床上猪圆环病毒病主要采取药物治疗,但临床用药混乱,疗效不确切,迫切需要筛选高效防治药物。本研究对临床上常用的抗病毒药物金刚烷胺、利巴韦林、盐酸阿比朵尔、黄连、金银花、连翘、板蓝根对猪圆环病毒的活性抑制作用进行了检测,以期筛选出高效药物,为临床防治该病提供选药依据。
MTT染色法能定量检测细胞的增殖活性,来间接反应药物的抗病毒效果。为此我们将MTT作为细胞培养物中病毒增殖情况的指示系统。本研究利用。PK-15细胞建立抗猪圆环病毒药物的筛选模型,设立正常细胞对照组。96孔板培养细胞24 h,细胞长成单层细胞后,每孔加入猪圆环病毒液,继续培养6 h。在无毒性浓度范围内加入不同浓度药物,继续培养24 h,加入MTT培养4 h,小心吸取上清液弃去,加入二甲基亚砜,37℃下孵育30 min,用酶标仪在490 nm下测定OD值,根据公式计算病毒的抑制率和药物的TI。
中药提取物抗猪圆环病毒活性结果:黄连的IC50为363.2μg/mL,治疗指数TI为13.8,金银花的IC50为719.7μg/mL,治疗指数TI为4.1,连翘的IC50为1596.7μg/mL,治疗指数TI为4.6,板蓝根的IC50为1189.4μg/mL,治疗指数TI为5.0,筛选出了高效的抗病毒中药药物黄连。
化学药物抗猪圆环病毒活性的结果:利巴韦林的IC50为5.53μg/mL,治疗指数TI为33.8,金刚烷胺的IC50为1.19μg/mL,治疗指数TI为124.9,盐酸阿比朵尔的IC50为6.85μg/mL,治疗指数TI为33.1,筛选出了高效抗病毒药物金刚烷胺。
试验结果表明,实验药物对猪圆环病毒均具有抑制作用,中药的抗病毒活性总体上要低于西药;中药中,黄连的抗病毒活性最高;西药中,金刚烷胺的抗病毒活性最高。
猪圆环病毒;增殖活性;MTT染色法;治疗指数;体外筛选
河北农业大学
硕士
基础兽医学
刘聚祥
2012
中文
S858.28;S852.659.2
45
2012-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）