ALK基因在肺腺癌患者支气管镜标本中的检测
目的：
EML4/ALK(echinoderm microtubule-associated protein like4/anaplastic lymphoma kinase，棘皮动物微管相关类蛋白4/间变淋巴瘤激酶)融合基因在亚洲NSCLC患者中表达率在10％左右，我们对中国肺腺癌患者进行ALK基因的检测，并分析临床病理表现与支气管镜标本检出率的关系，以明确支气管镜小标本用于ALK基因检测时的检出率和阳性率，及与提高检出率相关的因素。
方法：
收集100例肺腺癌患者临床资料和支气管镜组织标本，采用原位免疫荧光杂交和免疫组织化学两种方法进行ALK基因检测，并分析临床病理因素包括：支气管镜下表现、活检部位和数量、免疫组织化学切片数量、病理特征及肿瘤细胞数目和比例与小标本检出率间的关系，同时比较ALK基因阳性和阴性患者的临床特征和预后情况。
结果：
共收集到108例患者的临床资料和92例患者的支气管镜组织标本。中国肺腺癌患者ALK基因表达率为7.8%(6/77)，原位免疫荧光杂交法对支气管镜标本的检出率为71.3%(77/108)。左肺下叶和左主支气管活检部位的FISH检出率高于其他部位（P=0.004）。肿瘤细胞数目大于100个者检出率更高(P=0.00)。没有发现年龄、性别、临床分期、支气管镜下肉眼表现、活检数量、病理诊断明确度、分化程度及免疫组织化学所用切片数与原位免疫荧光杂交法检出率之间的关系检出。ALK基因在小于50岁者中阳性率更高（P=0.01）。6例ALK基因阳性者全部不吸烟,5例有资料者均为低分化癌，但P＞0.1。没有发现ALK基因表达与性别、临床分期及支气管镜下表现等因素的相关性。2例ALK阳性者生存时间分别只有4个月和9个月。采用D5F3单抗的免疫组织化学法敏感性50%，特异性100%。
结论：
FISH法对支气管镜小标本ALK基因的检出率为71.3%，在中国肺腺癌患者中的阳性率为7.8%。左肺下叶和左主支气管部位的检出率高于其他部位。肿瘤细胞数目大于100个者检出率高。ALK基因阳性者年龄更小。D5F3单抗用于免疫组织化学法的敏感性不高，特异性好。
EML4/ALK融合基因在非小细胞肺癌患者中的检测。棘皮动物微管相关类蛋白4/间变性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule-associated proteinlike4/Anaplastic lymphoma kinase,EML4/ALK)为发生在2号染色体短臂上的融合基因，特异性表达于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)患者的肿瘤组织中。其表达阳性者具有为肺腺癌、不吸烟及与表皮因子生长受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)、K-ras基因表达互斥等特征。EML4/ALK表达阳性者对ALK激酶抑制剂的治疗有效，因此筛选出EML4/ALK阳性者有重要的临床意义。目前最常用的为原位免疫荧光杂交法(fluoresceince in situ hybridization，FISH)，敏感性和特异性高，技术成熟，有标准试剂盒，但成本较高，标本不易保存。聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction，PCR)最早用于发现EML4/ALK基因，但对标本要求高，易出现假阳性，较少用于临床检测。免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)的标本可以长期保存，成本较低，但EML4/ALK蛋白在NSCLC中表达不高，如若可以通过增加抗体浓度、抗体放大系统或使用新型抗体来提高IHC的阳性率，则是一种更加符合临床需求的检测方法。
棘皮动物微管相关类蛋白4;间变性淋巴瘤激酶;非小细胞肺癌;支气管镜标本;肺腺癌;基因检测
清华大学医学部;北京协和医学院;中国医学科学院
博士
临床医学
陆慰萱;王孟昭
2012
中文
R734.2;R730.43
50
2012-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）