癌基因iASPP和iASPPsv对造血干细胞的调节作用及其在白血病致病作用研究
研究目的：检测p53诱导凋亡抑制因子(iASPP)的两个剪接体----iASPP(828aa，全长型)与iASPPsv（407aa，截短型）在急性白血病中的表达，并通过转基因技术研究这两个剪接体对小鼠骨髓细胞自我更新、定向分化中的作用，探讨其对造血干细胞功能的影响及在白血病发生发展中的作用机制。
研究方法：使用RT-PCR及Westem-blot的方法检测147例急性白血病病人骨髓单个核细胞(BMMNC)中iASPP与iASPPsvmRNA和蛋白表达；构建hMHS21/45vav-iASPP、hMHS21/45vav-iASPPsv载体，建立在造血系统高表达iASPP与iASPPsv的转基因动物模型；采用多色流式细胞仪分析和分选小鼠骨髓细胞、竞争移植、极限稀释及造血干细胞凋亡、迁移等实验研究iASPP和iASPPsv对造血干祖细胞自我更新、定向分化及增殖的调节作用。
结果：急性白血病患者中iASPP和iASPPsv的mRNA与蛋白表达均显著高于正常人对照组，其中iASPPsv的表达上调更明显（P=0.034和P＜O.01）。进一步研究发现，iASPP和iASPPsv剪接体对造血干祖细胞生物学功能的影响及白血病发生发展过程中的作用存在着差异，iASPP和iASPPsv转基因小鼠发生肿瘤的中位年龄分别是16个月、11个月。iASPP可能主要通过刺激小鼠骨髓中造血干祖细胞的增殖，提高长期造血干细胞(LT-HSCs)和包括共同髓系祖细胞(CMP)或粒单核细胞系祖细胞(GMP)等造血祖细胞的比例，增强小鼠骨髓重建能力。iASPPsv则主要促进造血干祖细胞自我更新，因而骨髓中造血干祖细胞数量减少，共同髓系祖细胞(CMP)或粒单核细胞系祖细胞(GMP)的比例降低，从而削弱了高表达iASPPsv的骨髓细胞在竞争移植中的骨髓重建能力。另一方面，由于高表达iASPP或iASPPsv使骨髓细胞对辐射引起的凋亡作用抗性增强，导致遗传学损伤的累积，增加了小鼠发生白血病和肿瘤的机率。
结论：癌基因iASPP和iASPPsv能够促进造血干祖细胞自我更新、增殖，以及抗照射引起的凋亡，增加这些细胞累积遗传学突变的机率，并且在急性白血病中高表达，表明它们可能参与正常造血干细胞向白血病干细胞的转化，导致白血病和肿瘤的发生。鉴于iASPPs与肿瘤的密切联系，抑制iASPPs有望成为肿瘤治疗的一项新策略。
癌基因iASPP;癌基因iASPPiASPPsv;p53调控;造血干祖细胞;急性白血病;致病作用
清华大学医学部;北京协和医学院;中国医学科学院
博士
内科学(血液病学)
王建祥
2010
中文
R733.7;R730.21
92
2012-10-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）