益气养血方治疗骨关节炎部分作用机理研究
目的：探讨益气养血方干预Hulth法造模的兔KOA模型血清中IL-1β、TNF-α的表达，软骨组织形态学变化及软骨细胞凋亡情况，并对益气养血方的安全性进行评估。
方法：40只日本大耳白兔随机分为4组，即假手术组、KOA模型组、阳性药组(双醋瑞因)、益气养血方组各10只。每组动物自由饮水进食1周后开始实验。其中KOA模型组、阳性药组(双醋瑞因)、益气养血方组均以改良Hulth法复制右膝OA模型，假手术组方法相同，但不切断内侧副韧带、前后交叉韧带，不切除内侧半月板。术后4周开始给药，假手术组、KOA模型组以生理盐水灌胃，每日1次；阳性药组(双醋瑞因)、益气养血方组分别按换算结果配制药液灌胃，每日1次，连续6周。10周后取兔血清及双膝关节，ELISA泫检测血清IL-1β、TNF-α含量，HE染色观察关节软骨形态学变化，TUNEL法检测软骨细胞凋亡，并进行急性毒性实验。
结果：1、HE染色观察关节软骨形态学变化：形态学分析显示假手术组膝关节软骨层结构正常；模型组膝关节软骨层破坏严重；阳性药组、益气养血方组膝关节软骨层破坏较模型组明显减轻。
2、模型组血清TNF-α水平明显高于假手术组，组间对比有显著差异(P＜0.05)；而益气养血方组、阳性药组血清TNF-α水平低于模型组，组间对比有显著差异(P＜0.05，P＜0.01)。
3、模型组血清IL-1β水平明显高于假手术组，组间对比有显著差异(P＜0.01)；而阳性药组血清IL-1β水平低于模型组，组间对比有显著差异(P＜0.01)；益气养血方组血清IL-1β水平低于模型组，组间对比无显著差异(P＞0.05)。
4、镜下观察假手术组基本见不到凋亡的细胞；模型组凋亡细胞数量明显增多；益气养血方组凋亡细胞数量明显少于模型组。
5、小鼠的最大灌胃体积量相当于临床成人(体重按70kg计)拟用量的195倍。
结论：1、假手术对膝关节软骨未造成损害；益气养血方对膝关节软骨有保护作用。
2、益气养血方对血清TNF-α的表达有较明显的下调作用，以起到延缓骨性关节炎模型退变的作用。
3、益气养血方对血清中IL-1β的表达影响不明显，尚需进一步研究。
4、益气养血方对软骨细胞凋亡有一定的抑制作用。
5、益气养血方短期服用比较安全，尚需进一步研究。
益气养血方;骨关节炎;细胞凋亡;肿瘤坏死因子-a;白介素1β;形态学变化;TUNEL法检测
云南中医学院
硕士
中医内科学
彭江云
2012
中文
R274.9;R684
43
2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）