1,25(OH)2D3对U-937细胞高糖负荷损伤改善效果的实验研究
背景及目的:维生素D(VD)是一种脂溶性维生素,在调节钙磷代谢、骨骼代谢、骨质形成等方面起重要作用。近年来的研究发现,VD除传统钙磷调节作用外,还参与炎性反应、免疫调节、糖脂代谢等病理生理过程。研究发现,VD在2型糖尿病的发生发展中起重要作用,血清VD水平与2型糖尿病发病呈负相关,补充VD可能成为糖尿病的预防及治疗手段之一。本课题旨在研究高糖负荷下U-937细胞功能的损伤,以及1,25(OH)2D3对U-937细胞高糖负荷损伤的改善效果,并探讨相关生物学机制,为维生素D在糖尿病人群的合理应用提供依据。
方法:采用人U-937单核细胞株,将细胞分为六组,每组均设8个复孔,干预不同浓度的葡萄糖,葡萄糖浓度分别为11mmol/L(对照组)、15mmol/L(高糖1组)、20mmol/L(高糖2组)、25mmol/L(高糖3组)、30mmol/L(高糖4组)、45mmnol/L(高糖5组),干预24小时后检测各组单核细胞的吞噬功能、白细胞介素6(IL-6)及抵抗素分泌的情况。根据上述实验结果以45mmol/L的葡萄糖浓度建立U-937细胞的高糖状态,将细胞株分为五组,每组均设8个复孔,每组均干预45mmol/L的葡萄糖24小时,24小时后高糖状态建立。除对照组外,各实验组再分别干预不同浓度的1,25(OH)2D3,浓度分别为3.2×10-11mol/L(VD31组)、1.6×10-10mol/L(VD32组)、8×10-10mol/L(VD33组)、4×10-9mol/L(VD34组),干预24小时后检测各组单核细胞的吞噬功能、IL-6及抵抗素分泌的情况。单核细胞的吞噬功能采用流式细胞术(Flow CytoMetry,FCM)检测、IL-6和抵抗素采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测。
结果:干预不同浓度葡萄糖24小时后,单核细胞的吞噬功能在高糖4组(30mmol/L)和高糖5组(45mmol/L)分别为38.74和35.03,显著低于对照组的46.66;抵抗素的浓度在高糖2组(20mmol/L)、高糖3组(25mmol/L)、高糖4组、高糖5组分别为15.74ng/mL、15.54 ng/mL、17.97 ng/mL和28.04 ng/mL,显著高于对照组的11.63ng/mL;IL-6的浓度在高糖4组、高糖5组分别为20.9 pg/mL和31.68 pg/mL,显著高于对照组的15.55 pg/mL。对高糖状态下的单核细胞干预不同浓度的1,25(OH)2D3后,荧光功能在VD32组(1.6×10-10mol/L)为41.2,显著高于对照组的34.86;抵抗素和IL-6在各实验组的浓度与对照组相比均显著降低。
结论:高浓度葡萄糖可抑制单核细胞的吞噬功能,增加抵抗素和IL-6的分泌;1,25(OH)2D3可改善高糖对单核细胞吞噬功能的抑制作用,并减少抵抗素及IL-6的分泌。
高糖负荷损伤;单核细胞;抵抗素;U-937细胞;维生素D
青岛大学
硕士
营养与食品卫生学
马爱国;汪求真
2012
中文
R587.101;R151.2
36
2012-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）