刺参酸性粘多糖对诱发肝癌大鼠的免疫调节作用
目的:通过建立诱发性大鼠肝癌动物模型,考察刺参酸性粘多糖(SJAMP)在诱发大鼠肝肿瘤过程中的作用,并从免疫功能角度研究其对肝肿瘤发生的影响。
方法:将50只wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、SAJMP低剂量组(17.5mg/Kg,C组),SJAMP中剂量组(35mg/Kg,D组),SJAMP高剂量组(70mg/Kg,E组)。除正常对照组(A组)外,其余各组灌胃2‰DEN生理盐水溶液以诱发肝肿瘤,SJAMP干预组(C组、D组、E组)同时灌胃给予SJAMP,饲养期间每周至少称重一次,直至第16周;第16周用水合氯醛腹腔麻醉大鼠,腹主动脉取血,检测ALT、AST等肝功指标;无菌取脾、胸腺,立即称重,计算脾指数和胸腺指数;分别计数肝脏上有一条直径大于3mm和5mm的瘤结节,并测量最大瘤结节的长径和短径,计算抑瘤率;贴壁法分离纯化Mφ,用中性红吞噬实验检测脾巨噬细胞吞噬功能;MTT法检测脾巨噬细胞的杀伤功能;MTT法检测自然杀伤细胞活性:ELISA法检测血清中TNF-α和IL-2的水平;流式细胞术分析大鼠外周血T淋巴细胞亚群。
结果:①与正常对照组相比,诱癌实验组大鼠体重增长较慢,至实验第16周时,E组和B组大鼠体重有统计学差异(P<0.05);②诱癌实验组ALT、AST和GGT均升高(P<0.05),其中模型组升高最为显著,随干预剂量增加,SJAMP干预组以上指标呈逐渐下降趋势,且与模型组比较有统计学意义(P<0.01);③模型组胸腺指数与正常组组相比有所降低(P<0.05),但脾指数有所升高(P<0.05),与模型组相比,SJAMP干预组脾指数和胸腺指数明显升高(P<0.05),并呈现出剂量-效应关系;④SJAMP可显著抑制肝肿瘤的发生,减少癌结节的发生数量,SJAMP干预组大鼠大于3mm和大于5mm的结节数明显少于模型组(P<0.05);最大结节的平均体积明显小于模型组(P<0.01);⑤模型组和SJAMP干预组巨噬细胞吞噬能力较正常对照组均增(P<0.05),SJAMP干预组增加更为明显,其中D组和E组与C组相比较,有统计学意义(P<0.01);⑥与正常对照组相比,模型组巨噬细胞的杀伤能力降低(P<0.01),SJAMP干预组巨噬细胞的杀伤能力较模型组增加(P<0.01);⑦模型组自然杀伤细胞活性较正常对照组明显降低(P<0.01),SJAMP干预可以提高诱癌大鼠的自然杀伤细胞活性(P<0.05);⑧模型组和SJAMP干预组的血清TNF-α水平高于正常组(P<0.01),提示诱癌各组大鼠均可能存在肝脏损伤,SJAMP干预组中D组和E组与模型组相比较,差别均具有统计学意义(P<0.01);⑨模型组大鼠血清IL-2水平明显降低于正常组(P<0.01),SJAMP干预组的IL-2水平较模型组升高(P<0.01);⑩模型组CD3+、CD4+T淋巴细胞和CD4+/CD8+比值比正常组均明显降低(P<0.05),而SJAMP干预组随干预剂量的增加,CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞和CD4+/CD8+比值逐渐增高。
结论:SJAMP不能完全阻断肝癌的发生过程,但对肝癌的发生有明显的抑制作用,其机制可能是通过刺激免疫器官组织增生,保护正常肝细胞,增强机体的巨噬细胞、自然杀伤细胞和T淋巴细胞的免疫能力,调节具有抗肿瘤效应的TNF-α、IL-2等重要细胞因子来实现的。
二乙基亚硝胺;刺参酸性粘多糖;巨噬细胞;自然杀伤细胞;T淋巴细胞亚群;诱发肝癌;免疫调节
青岛大学
硕士
营养与食品卫生学
宋扬
2012
中文
R735.7;R730.52
39
2012-09-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）