丙泊酚对豚鼠胃窦平滑肌细胞L-型钙离子通道的作用
目的：研究丙泊酚对豚鼠胃窦平滑肌细胞膜L-型钙离子通道电流(ICa2+)的影响，探讨丙泊酚对胃肠动力的影响。
方法：采用传统全细胞膜片钳技术，记录正常豚鼠胃窦平滑肌细胞膜L-型ICa2+，换Ba2+做载流子后，记录Ba2+电流(IBa2+)。对照组采用丙泊酚的溶媒成分10％脂肪乳，用Ba2+-PSS稀释成与78μg/ml丙泊酚同等浓度后灌流细胞，观察IBa2+变化，然后洗脱，记录电流图。丙泊酚组分为低浓度(2μg/ml)和高浓度(78μ,g/ml)组。待正常IBa2+稳定后用低浓度丙泊酚溶液灌流细胞，观察电流随时间的变化，然后洗脱，观察跨膜电流是否恢复。同样，在用高浓度丙泊酚溶液灌流细胞时观察记录跨膜IBa2+的变化，然后洗脱，观察IBa2+是否恢复。每组均应完整记录三例以上。
结果：首先用Ca2+-PSS灌流细胞，细胞膜电位钳制在-80mV，脉冲电压从-60mV开始，去极化刺激到+60mV，阶跃电压10mV，持续时间400ms，引出Ca2+电流(ICa2+)。ICa2+在-30 mV～-20mV出现，在0 mV达到最大值，电流峰值为(-63.62±19.46)pA，反转电位在+40mV左右出现。然后用B a2+加载，记录Ba2+电流(IBa2+)，IBa2+与ICa2+特点相同，也是在-30 mV～-20mV出现，在0 mV达到最大值，电流峰值增大到(-286.63±51.57)pA，反转电位在+40mV左右出现。持续用Ba2+-PSS灌流细胞，待IBa2+稳定后用与78μg/ml丙泊酚等容积的10%脂肪乳灌流细胞，观察到IBa2+没有显著变化。持续用Ba2+-PSS灌流细胞，膜电位钳制在-80mV，每间隔10s给予细胞一次0mV电压的单刺激，持续时间400ms，引发出IBa2+，待电流稳定后用2μg/ml丙泊酚溶液灌流细胞，药物灌流开始后IBa2+先轻微增大，持续约30s，然后IBa2+逐渐减小。药物灌流开始后170s左右IBa2+趋于稳定，稳定时IBa2+减小到电流最大值的(66.32±4.41)%。待变化稳定后用Ba2+-PSS洗脱药物，电流大小立即开始恢复，恢复电流为加药前电流最大值的(91.83±1.24)%(n=4)。用78μg/ml丙泊酚溶液灌流细胞，给细胞施加同样的单刺激，IBa2+随时间逐渐减小，灌流开始后约190s稳定，稳定时IBa2+减小到电流最大值的(75.63±3.51)%。然后用Ba2+-PSS洗脱药物，电流仍然能大部分恢复，恢复电流为加药前电流值的(94.58±3.19)%(n=3)。
结论：全细胞膜片钳实验表明，亚催眠剂量的丙泊酚抑制豚鼠胃窦平滑肌细胞跨膜钙离子内流，导致细胞内钙离子浓度降低，这可能是亚催眠剂量丙泊酚导致胃肠道平滑肌收缩力减弱、进而导致胃肠动力减慢的原因之一。
丙泊酚;膜片钳;L-型钙离子通道;胃肠动力;胃窦平滑肌细胞
大连医科大学
硕士
麻醉学
闻庆平
2010
中文
R965;R322.44
33
2012-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）