新型蛋白酪氨酸激酶抑制剂(ZHT系列化合物)的研究
目的：肿瘤是威胁人类健康的恶性疾病，其发生多与细胞信号转导异常密切相关。蛋白酪氨酸激酶通过将蛋白质酪氨酸磷酸化，实现细胞信号的转导和放大，常在肿瘤细胞中过度表达。本研究在已报道具有蛋白酪氨酸激酶抑制活性的黄酮类结构的基础上，进行结构修饰，设计并合成了一系列化合物，并对其药理活性进行初步测定，旨在发现新的抗肿瘤药物。
方法：1.通过对不同来源的蛋白酪氨酸激酶进行立体结构的叠合，选取1XKK、1AGW、1PKG、1Y6A、10EC和20J9作为对接受体；基于黄酮类结构设计了一系列小分子结构(代号为ZHT002～ZHT011)，选择已上市的蛋白酪氨酸激酶抑制剂lapatinib、dasatinib、imatinib、sunitinib、sorafenib和dovitinib作为阳性配体，选择无抗肿瘤活性的zanamivir、linezolid、aspirin、ritonavir和cephalosporins作为阴性配体。利用计算机辅助药物设计软件Gold3.0.1和Glide7.5.112的分子对接方法，计算了小分子配体与受体的结合能力，为确定目标分子提供理论基础。2.通过化学合成实验得到目标化合物，以核磁共振进行结构确证。3.在人早幼粒细胞白血病HL-60细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞、人结肠癌SW-480细胞和人乳腺癌MCF-7细胞等体外培养的肿瘤细胞株上，采用常规MTT方法，以细胞生长抑制率及半数抑制浓度(IC50)为指标初步测定化合物的活性。
结果：1.分子对接结果显示：阳性配体与各受体对接评分和结合能都较好，大部分ZHT分子与各受体都有很好的结合能力，存在合理的结合模式，但没有特异性，可能为多靶点酪氨酸激酶抑制剂。2.通过合成得到了10个目标化合物即ZHT002～ZHT011，经核磁共振氢谱和碳谱确认结构正确。3.药理活性测定结果显示：ZHT009和ZHT010对4种体外培养的人肿瘤细胞株都有较强的增殖抑制作用，IC50都在7.76μg/ml以下。其中ZHT010对人胃腺癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用最强，IC50为0.64μg/ml。ZHT009对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞、人结肠癌SW-480细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的IC50分别为3.44、7.16、4.86和7.76μg/ml；ZHT010对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞、人胃腺癌SGC-7901细胞、人结肠癌SW-480细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的IC50分别为1.58、0.64、2.47和5.22μg/ml；ZHT001、ZHT005、ZHT007和ZHT011对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞有一定增殖抑制作用，IC50分别为27.01、58.55、16.59和21.36μg/ml；ZHT002、ZHT004和ZHT008对此细胞株生长没有影响。除了ZHT009和ZHT010其它ZHT化合物对人胃腺癌SGC-7901细胞、人结肠癌SW-480细胞和人乳腺癌MCF-7细胞的生长基本没有影响。
结论：1.基于酪氨酸激酶结构设计并合成的黄酮类衍生物具有明显的抗肿瘤活性，表明基于理论指导的发现研究具有一定的可行性。2.化合物的活性与目标一致，表明其作用机制可能是多靶点的酪氨酸激酶抑制剂。3.合成的化合物ZHT002～ZHT011核磁共振确认结构正确。4.ZHT009和ZHT010对体外培养的4种人肿瘤细胞具有很强的增殖抑制作用；ZHT001、ZHT005、ZHT007和ZHT011对人早幼粒细胞白血病HL-60细胞有一定的增殖抑制作用。
抗肿瘤药物;蛋白酪氨酸激酶;信号转导;分子对接;结构设计
天津医科大学
硕士
药学;药理学
徐为人
2008
中文
R979.1
80
2011-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）