Al(OH)3和CpG ODN免疫佐剂对丙型肝炎病毒多表位抗原PCX3疫苗免疫效果影响的研究
丙型肝炎病毒(HCV)为单股正链RNA病毒，其基因组编码约3010～3033aa的蛋白前体，从N-端起依次为核心蛋白(C)、包膜蛋白(E)、非结构蛋白NS1-NS5B。HCV具有高度的变异性，能够迅速突变逃逸宿主的免疫系统。因此，给疫苗的研究带来许多的困难。近年来的研究提示理想的HCV疫苗必须能够诱发高水平、广谱而特异的体液免疫应答和细胞免疫应答。
针对HCV的高度变异性及免疫特点，在HCV基因产物中优选了5个具有良好免疫原性的高度保守B/T细胞表位，组合成一个多表位抗原基因pcx，这些表位分别来自核心蛋白(1～16aa，132～141aa)，E1(126～135 aa)，NS3(139～147aa)及NS5B(768～775aa)，以及破伤风毒素的T细胞表位用以增强T细胞免疫。pcx基因经过串联重复之后，构建成多表位抗原基因pcx3，与6×His-tag融合后，在E.coli宿主中获得高效表达，并通过Ni2+-NTA-agarose纯化。
以HCV蛋白疫苗PCX3为抗原，分别加入Al(OH)，3佐剂，CpG ODN佐剂，以及两种佐剂联合作用的复合佐剂，对雄性六周龄BALB/c小鼠进行常规免疫。Al(OH)，3和CpG ODIN复合佐剂与PCX3抗原联合作用组与其他免疫组相比，在ELISA检测小鼠血清中特异性IgG和IgM抗体实验中，该组小鼠产生的特异性IgG(1×106)和IgM(1×105)抗体滴度最高，持续时间最长；在非放射性细胞毒活性检测试剂盒检测NK细胞的自然杀伤效应(CTL)实验中，该组小鼠诱发的CTL杀伤效应(40.91％)，显著高于其他免疫组;流式细胞仪对小鼠淋巴细胞亚群进行分型分析发现，从第2周开始，该组小鼠体内CD4+/CD8+细胞比值(3.26)显著高于PCX3抗原单独作用组。结果表明，Al(OH)，3和CpG ODN复合佐剂，可以从体液免疫和细胞免疫两方面对HCV蛋白疫苗PCX3的免疫效果进行增强，并且具有协同效应。
蛋白疫苗;体液免疫;细胞免疫;丙型肝炎病毒
复旦大学
硕士
遗传学
任大明
2009
中文
R392.7
65
2011-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）