金乌骨通片的研制及其质量标准研究
金乌骨通片为已有国家质量标准品种改变剂型但不改变给药途径的制剂，为中药复方制剂，由金毛狗脊、乌梢蛇、葛根、淫羊藿、木瓜、土牛膝、土党参、姜黄、威灵仙、补骨脂十余味中药组成。用于肝肾不足，风寒湿痹、骨质疏松，骨质增生引起的腰腿酸痛、肢体麻木等症。在分析原胶囊剂的处方中每味中药的有效成分及其它的药理作用的基础上，结合企业制剂制备条件等实际情况，研究了该药片剂的制备工艺。
目的：通过正交优化法设计合理工艺路线，进行生产方法和条件的筛选，制定出方法简便、条件确定的稳定的生产工艺，优选出金乌骨通片的最佳提取生产工艺和制备方法。
方法：
1.采用正交试验筛选提取工艺：以提取次数、提取时间、加水量三因素作为考察工艺因素，以处方中淫羊藿的有效成分淫羊藿苷的含量为考察指标优选水提产品工艺。
2.工艺研究：以优选的最佳工艺对处方中的药材进行提取，并考察浸膏粉的吸湿性及流动性情况。
结果：
1.通过淫羊藿苷指标的测定，利用正交试验筛选出的最佳制备工艺为：取除葛根、姜黄之外的其余8位药材加入十倍水，煎煮次数为三次，每次一个半小时。
2.成型工艺研究：将水提取液浓缩成的一定密度的清膏，加入葛根、姜黄生药粉充分混匀成软材，合适温度烘干后进行粉碎，加入药粉的浸膏经吸湿性和流动性考察符合要求，进行压片。
结论：通过正交试验优选出金乌骨通片的最佳制备工艺，该制备工艺稳定。
药品的质量是药品治疗效果的基本保障、关系到患者的健康，也关系到药品本身的推广应用和发展。专属性强、简便易行、稳定、精确的质控标准是保证药品质量的依据，因此，对金乌骨通片进行质量标准研究，进行性状、定性鉴别、含量测定，将为本品的质量控制提供分析方法和理论依据，具有重要意义。
目的：建立金乌骨通片的质量标准。1利用薄层色谱法对金乌骨通片中葛根、姜黄、补骨脂进行定性鉴别。2片剂的制剂通则检查。3建立金乌骨通片中淫羊藿苷和葛根素的高效液相色谱含量测定方法。
方法：
1.鉴别方法的研究：利用薄层色谱法，选用恰当的提取溶剂和方法，以及适宜的薄层固定相、色谱展开系统、斑点显色系统等，对处方中的主药葛根、姜黄、补骨脂进行鉴别。
2.淫羊藿苷的含量测定：①提取：片芯粉碎后加入适量稀乙醇，进行超声处理，超声40分钟后，用稀乙醇补足减失量，再进行离心处理10分钟，滤过，取续滤液即得。②色谱条件：选择合适的固定相以及色谱的检测温度、流动相组成、配比、流动相的流速等以使淫羊藿苷峰与其他峰完全分离符合要求。③系统适用性试验：在确定的色谱条件下，考察有效成分淫羊藿苷峰的分离度、理论塔板数等分离指标。④标准曲线的制备：配制一系列浓度的淫羊藿苷对照品溶液，分别进样测定峰面积，以淫羊藿苷对照品浓度为横坐标和相应的峰值为纵轴，绘制标准曲线。⑤检测限：淫羊藿苷标准溶液逐步稀释测定，直至淫羊藿苷峰高是噪声峰高的3倍。⑥重复性：取同一样品，分成5份溶液，确定淫羊藿苷含量。⑦精密度试验：取样品制备供试品溶液，在此色谱条件基础上，重复5次注入，测量峰面积。⑧稳定度测试：参加测试的溶液放置0，2，4，6，8，24小时后，测定该溶液的色谱峰面积。⑨加样回收率试验：取已知含量的金乌骨通片样品5份，加入定量的淫羊藿苷对照品溶液，测定淫羊藿苷的含量。
3.葛根素的含量测定：①提取：片芯粉碎后加入一定量的乙醇，回流提取30分钟后氯仿提取，残渣加30％乙醇取续滤液即得。②色谱条件：选择合适的固定相以及色谱的检测温度、流动相组成、配比、流动相的流速等以使葛根素峰与其他峰完全分离符合要求。③系统适用性试验：在色谱条件下，考察葛根素峰的分离度、理论塔板数等分离指标。④标准曲线的制备：配制一系列浓度的葛根素对照品溶液，分别进样进行峰面积的测定，以有效成分葛根素对照品溶液浓度为横坐标，相应的葛根素峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线。⑤检测限：葛根素标准溶液逐步稀释，直到葛根素峰三倍于噪音的峰值。⑥重复性：以同一样品5份，测试含量，来确定样品中的葛根素含量。⑦精密度试验：取样品制备试液，根据已确定了的色谱条件，进行五次重复注样，测定葛根素峰面积。⑧稳定性试验：取供试品溶液被放置0，2，4，6，8，24小时，根据色谱条件，测定葛根素峰面积⑨加样回收率试验：取已知含量的金乌骨通片样品九份，加入定量的葛根素对照品溶液，测定葛根素的含量。
结果：
1.鉴别方法的研究：主药葛根、姜黄、补骨脂分别采用相应的薄层鉴别方法，薄层展开后均显示与对照药材相同的特异性斑点，分离效果好。
2.淫羊藿苷的含量测定：①提取：超声提取40分钟，片芯中淫羊藿苷可被完全提取。②最佳色谱条件：选择十八烷基硅烷化硅胶为固定相，磷酸溶液(0.075mol·L-1，用三乙胺调整pH为4.5)：乙腈(70:30)为流动相，测定波长270nm，柱温：30℃，流速1.0mL·min-1，进样量20μL。⑧系统适用性试验：在上述色谱条件下，淫羊藿苷峰形良好，无杂质峰干扰，理论塔板数以淫羊藿苷计不低于3000，色谱峰不对称因子为1.03～1.12，保留时间大约在15分钟左右，淫羊藿苷峰与相邻杂质峰分离度均大于1.5。④标准曲线的制备：淫羊藿苷浓度在1.6-16.0μg·mL-1范围内与峰面积有良好的线性关系，回归方程为C=3.16×10-4A+0.2124，相关系数r=0.9999。⑤最低检测限试验：为2.1ng。⑥重复性试验：取同一样品5份，测定淫羊藿的含量为168μg/片，重复性良好。⑦精密度试验：重复进样5次，峰面积的RSD值为0.40％。⑨稳定性试验：供试品溶液在12小时内稳定。⑨加样回收率试验：样品的平均加样回收率为100.17％，RSD为0.91％。
3.葛根素的含量测定：①提取：回流提取30分钟后氯仿提取葛根素可被完全提取。②最佳色谱条件：选择十八烷基硅烷化硅胶为固定相，甲醇-水(23:77)为流动相，测定波长250nm，柱温：30℃，流速1.0mL·min-1，进样量20μL。③系统适用性试验：在上述色谱条件下，葛根素峰形良好，无杂质峰干扰，理论塔板数以葛根素计不低于4000，色谱峰不对称因子为1.05～1.14，保留时间大约在22min左右，葛根素峰与相邻杂质峰分离度均大于1.5。④标准曲线的制备：葛根素浓度在0.5-1.5μg范围内与峰面积具有良好的线性关系，回归方程式计算为C=1164.79A+37334.04，相关系数r=0.9977。⑤最低检测限试验：为2.5ng。⑥重复性试验：取同一样品5份，测定葛根素的含量为2.69mg/片，重复性良好。⑦精密度试验：重复进样5次，峰面积的RSD值为0.12％。⑧稳定性试验：供试品溶液在12小时内稳定。⑨加样回收率试验：样品的平均回收率为98.82％，RSD为0.82％。
结论：
1.葛根、姜黄、补骨脂的薄层鉴别方法分离效果好，特异性强，重现性好，可作为金乌骨通片的鉴别方法。
2.HPLC法测定淫羊藿苷和葛根素的含量，准确度高、精密度好、简便快捷，可作为金乌骨通片中淫羊藿苷和葛根素的含量测定方法。
目的：按《中国药典》2005年版中药物稳定性试验指导原则的规定，考察本样品金乌骨通片在临床应用包装条件下的稳定性情况，以确定其有效期。
方法：在临床应用的包装条件下，对金乌骨通片三批样品按“金乌骨通薄膜衣片质量标准”项下规定内容进行检测，以生产当月检测结果为0月结果，室温下自然贮存，分别于第0、6、12个月考察1次。
结果：三批样品在放置时间为0、6、12个月时，分别进行性状的观察、定性鉴别以及含量测定，和片剂制剂通则检查，结果均符合规定。
结论: 该制剂在选定的包装条件下质量稳定,可暂定有效期为一年。
薄层色谱法;高效液相色谱法;金乌骨通片;淫羊藿苷;葛根素;质量标准
河北医科大学
硕士
药剂学
杜青;曹德英
2011
中文
R284.1;O657.72
61
2011-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）