维生素B1对百草枯中毒大鼠急性肺损伤保护作用的实验研究
目的：本研究通过建立百草枯(Paraquat， PQ)中毒大鼠模型，观察维生素B1对百草枯中毒大鼠急性肺损伤的保护作用及其机制。
方法：66只健康成年雄性SD大鼠随机分为四组：正常对照组（Control， NC组）6只、百草枯染毒组（Paraquat， PQ组）20只、百草枯+低剂量维生素B1组(Paraquat+Low-dose Vitamin B1，PQ+LVB组)20只和百草枯+高剂量维生素B1组（Paraquat+High-dose Vitamin B1, PQ+HVB组）20只。NC组给予1ml生理盐水灌胃，0.5h后给予1ml生理盐水灌胃；PQ组给予100mg/kg PQ灌胃，0.5h后给予1ml生理盐水灌胃；PQ+LVB组给予100mg/kg PQ灌胃，0.5h后给予100mg/kg维生素B1灌胃；PQ+HVB组给予100mg/kg PQ灌胃，0.5h后给予200mg/kg维生素B1灌胃。在染毒的第1、3、7d分批处死动物。心脏采血，37℃放置2h，离心取上清液，常规方法取肺组织。分别测定血清和肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量以及肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量；选取肺脏、肾脏进行常规HE、MASSON染色，观察病理组织学变化。免疫组织化学方法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)在各组大鼠肺组织中的表达。
结果：
1.大鼠中毒表现：一般于染毒后2小时内各系统出现明显中毒症状，在1-3天最为明显。
2.血清中SOD、MDA含量：实验期间各时间点PQ组血清SOD活力明显低于NC组(P＜0.05)。随着时间的延长，PQ组血清SOD活力下降，d7较d1明显下降，差异具有统计学意义(P＜0.05)。随着时间的延长，维生素B1两个剂量组大鼠血清SOD活力呈现下降趋势。在相同时间点均高于PQ组，具有统计学意义(P＜0.05)。在第7天PQ+HVB组血清SOD活力高于PQ+LVB组，具有统计学意义(P＜0.05)。各组大鼠血清MDA含量与SOD活力呈现相反的规律。
3.肺组织匀浆中SOD、MDA含量：实验期间各时间点PQ组肺组织SOD活力明显低于NC组(P＜0.05)。随着时间的延长，PQ组肺组织SOD活力下降，d7较d1明显下降，差异具有统计学意义(P＜0.05)。随着时间的延长，维生素B1两个剂量组大鼠肺组织SOD活力呈现下降趋势。在相同时间点均高于PQ组，具有统计学意义(P＜0.05)。在第7天PQ+HVB组肺组织SOD活力高于PQ+LVB组，具有统计学意义(P＜0.05)。各组大鼠肺组织MDA含量与SOD活力呈现相反的规律。
4.肺组织羟脯氨酸含量：各组大鼠肺组织羟脯氨酸含量在第1天和第3天均没有明显差异(P＞0.05)。第7天各组HYP高于NC组(P＜0.05)。PQ+HVB组HYP值均低于PQ组和PQ+LVB组，差异具有统计学意义(P＜0.05)。
5.肺组织病理学改变：大体标本观察，NC组肺脏基本正常。PQ组肺脏肿胀变大，表面呈深暗红色，有明显的出血点或淤血。第7d局部肺组织变苍白，出现灰白色凹凸不平病灶。维生素B1干预后病变有所减轻，且以PQ+HVB组明显。光镜观察：NC组肺泡结构完整，正常。PQ组可见肺泡出血、纤维蛋白渗出，肺泡壁毛细血管扩张及炎性细胞浸润。维生素B1干预后病变有所减轻，且以PQ+HVB组明显。Masson染色可见正常组很少有蓝绿色胶原纤维沉积在支气管壁及肺泡间隔，而PQ组第7天时较多蓝色胶原纤维沉积与支气管壁及肺泡间隔，PQ+HVB组蓝染胶原沉积较少。
6.免疫组化结果：NC组TGF-β1基本没有表达。PQ组TGF-β1表达在染毒后7d开始明显，PQ+LVB组和PQ+HBv组病变较轻。
7.肾组织病理变化：大体标本呈暗红色，饱满，质不硬，切面皮髓分界清晰。光镜：NC组可见肾小球及肾小管结构清晰，小管内未见管型及颗粒。PQ组可见肾小管上皮细胞肿胀，伴空泡和颗粒变性。PQ+LVB组和PQ+HBV组病变较轻。
结论：
1.PQ中毒后大鼠体内出现明显氧化应激反应，导致急性肺损伤，进而出现肺纤维化。
2.维生素B1可以减轻百草枯中毒后所致的弥漫性肺损伤，抑制脂质过氧化，改善肺纤维化，作用机制也许与维生素B1拮抗百草枯毒性有关。
百草枯中毒;维生素B1;急性肺损伤保护;氧自由基;动物模型
河北医科大学
硕士
内科学
刘冰
2011
中文
R595.4;R977.22
45
2011-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）