流式细胞术快速检测“昆虫细胞-杆状病毒”体系中感染动力学参数的条件优化
杆状病毒表达载体系统为基因工程四大表达载体系统之一，在重组蛋白生产、疫苗的研制以及生物杀虫剂等方面都具有很高的应用价值。但由于杆状病毒感染过程复杂，缺乏一个准确的感染动力学模型，给工业化带来很大困难。
为了准确建立病毒感染动力学模型，需要精确测定病毒感染过程中的各项参数。本课题采用先进的流式细胞术跟踪检测病毒感染过程中的自由病毒滴度、感染和未感染细胞浓度以及多角体病毒浓度等参数，并探索了Sf-9细胞的三种同步化方法。最终得到如下结论：1.杆状病毒最佳染色条件：0.1％的多聚甲醛固定病毒30 min后，加入终浓度为1×10-4的SYBR Green I在80℃下孵育10 min；2.采用PE标记的抗体检测方法可以较好的确定细胞的感染率，比FITC检测结果要好；3.传统的胸腺嘧啶核苷双阻断法不适用于Sf-9细胞的同步化。
武汉工程大学
硕士
生物化工
张佑红
2010
中文
TQ455
60
2011-02-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）