A组轮状病毒NSP1基因的克隆表达及免疫学性质研究
轮状病毒（rotavirus，RV）属于呼肠病毒科（Reoviridae）轮状病毒属（Rotavirus），是一个直径约为70nm，无包膜，具有三层衣壳蛋白组成的正二十面体双链RNA病毒。RV是引起哺乳类和鸟类及人类腹泻的主要病原体，每年全球因Rv感染所导致的重症腹泻而死亡的儿童约600000。RV基因组包含11个分节段的双链RNA，编码6个结构蛋白（VP1-VP4，VP6，VP7）和6个非结构蛋白（NSP1-NSP6）。根据结构蛋白VP6的抗原性差异，可将已发现的轮状病毒分为A-G7个组，其中，A组为引起婴幼儿腹泻的主要病原。
RV NSP1在病毒与宿主的相互作用中发挥着重要的功能。本研究运用基因克隆和重组表达技术在大肠杆菌中表达了RV TB-Chen株NSP1蛋白，进行了NSP1的免疫学性质和RV感染细胞中NSP1蛋白的合成与分布以及NSP1的系统进化和基因分型研究。结果表明，大肠杆菌BL21（DE3）能高效表达重组NSP1蛋白（rNSP1），rNSP1表达量约占菌体总蛋白的34.4％。rNSP1能诱导免疫豚鼠产生特异性血清抗体。Western blot及免疫荧光检测结果表明，抗rNSP1血清抗体能特异性识别自身蛋白，对SA11，Wa株的NSP1蛋白有交叉反应性：免疫荧光结果还表明，SA11感染的MA104细胞中合成的NSP1蛋白在细胞质中区域化聚集形成辐射状排列的颗粒状结构，而Wa株的NSP1不能形成此样结构。分子系统进化研究结果表明，至今发现的A组RV至少可以分为16个不同的NSP1基因型，TB-Chen株NSP1为A2型。不同NSP1基因型病毒具有独特的敏感宿主范围，同一NSP1基因型可能感染不同种动物，同一种动物也可能感染不同基因型。本研究结果为进一步研究NSP1蛋白质的结构功能及其应用开发奠定了很好的基础。
清华大学医学部;北京协和医学院;中国医学科学院
硕士
病原生物学
陈元鼎
2010
中文
R373
63
2010-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）