真姬菇微卫星分子标记的开发及其种质资源分析
真姬菇（Hypsizygus marmoreus）是著名的食药用菌，具有广阔的开发利用前景。目前通过人工驯化和栽培实验，真姬菇已经实现了人工栽培，而且我国、日本和韩国等国家和地区的一些大型食用菌企业，都可以在人工控制温度、湿度、光照和空气成分的环境中，实现真姬菇的工业化栽培。
作为重要的栽培菌株，客观评价真姬菇栽培菌株种质资源的遗传多样性，掌握不同栽培菌株的鉴别方法，是充分保护和利用真姬菇种质资源，开展真姬菇良种选育，保护真姬菇品种知识产权，加强真姬菇菌种质量管理的基础。本研究从全国范围内收集了真姬菇27个主要栽培菌株，其中包括21株常规栽培真姬菇菌株和6株工业化栽培真姬菇菌株.根据形态学特征和ITS序列对所收集的真姬菇菌株进行了分类鉴定，利用SSR分子标记对真姬菇的种质资源进行分析研究。主要研究结果如下：
1.一部分形态特征（细密花斑，菜盘型等）可以将工业化栽培菌株与常规栽培菌株区分开；但两者仍具有一些相同的形态特征，如菌盖为伞型，菌盖土黄色等。
2.对供试菌株的ITS区域进行测序和比较分析，结果显示供试菌株的ITS序列长度为594bp，通过blast比对发现在种的水平上证明菌株来源准确。用PHILIP软件分析发现菌株间的相似系数约为99％，说明利用单一的ITS序列不能将菌株区分开。
3.利用简单重复序列（SSR）标记技术，以27个真姬菇菌株为供试材料，根据香菇、糙皮侧耳、灰盖鬼伞基因组序列设计引物，对真姬菇供试菌株进行转移扩增。从54对引物中筛选出23对能够扩增出稳定带型且菌株之间带型差异明显的SSR引物。利用23对引物对全部供试菌株进行扩增，共扩增133条条带，其中多态性条带为108条，多态性比率达到81.2％。UPGMA聚类分析结果表明，大部分常规栽培菌株（95％）和工业化栽培菌株（80％）聚在不同组，说明两者之间的遗传背景存在明显差异.
4.根据获得的菌株特有的SSR标记分析表明，2个工业化栽培菌株各自具有一条特异条带，通过引物组合法，利用7对引物，可以将其他工业化栽培菌株与常规栽培菌株区分开。
5.将所获得的SSR标记的图谱转化为较为直观的指纹图谱会使真姬菇种质资源的鉴定，品种登记更加方便快速。
真姬菇;内转录间隔区;种质资源;微卫星;多态性;分子标记
南京农业大学
硕士
微生物学
冯志勇;赵明文
2009
中文
S646.19
47
2010-12-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）