产γ-谷氨酰基转肽酶菌株的选育
茶氨酸是茶叶中的特征氨基酸，同时也是茶叶中的呈味物质之一。茶氨酸具有非常重要的作用。但是茶氨酸的常规提取方法工艺和操作程序复杂，而且操作过程难以控制，提取产量低等缺点。而微生物转化法的应用越来越广泛，其中以γ-谷氨酰转肽酶合成茶氨酸的方法更为简便有效，目前分泌γ-谷氨酰转肽酶的微生物主要有大肠杆菌，枯草芽孢杆菌以及地衣芽孢杆菌等菌种。而绝大多数菌株分泌的酶为胞内酶，不利于酶的提取和纯化。资料表明，枯草芽孢杆菌分泌的γ-谷氨酰转肽酶绝大多数能透过细胞膜和细胞壁到发酵液中，这就大大简化了实验的操作。
本论文从实验室保藏的菌株枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)出发，通过对其进行诱变的实验，选育出了高产γ-谷氨酰转肽酶的菌株，并且遗传稳定性良好。通过紫外诱变和微波诱变所获得的稳定高产γ-GGT菌株的酶活分别为3.56U/mL和3.52U/mL。
同时，本实验对所选育出来的高产γ-GTP菌株进行了发酵培养基的优化，在35℃培养时得到其最适发酵培养基组成是碳源为葡萄糖，最适氮源为酵母膏，最适初始pH值7.5，最适装液量60mL/250mL。通过正交试验设计及优化实验，得到各因素及水平的最佳组合，即碳源为葡萄糖，氮源为玉米粉，初始pH值为8，装液量为60mL。
本实验还对γ-谷氨酰基转肽酶的酶促反应进行了研究。酶促反应最适温度为35℃，最适pH值7.5，以及金属离子Ca2+和Mg2+对GGT活性有激活作用，而Cu2+，Mn2+和Zn2+对酶活性有抑制作用。
γ-谷氨酰转肽酶;培养基优化;酶促反应;菌株选育
安徽农业大学
硕士
营养与食品卫生学
李平
2010
中文
TQ925
36
2011-05-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）