钩端螺旋体Lig A基因的原核表达及抗原性分析
目的:钩端螺旋体病作为全球范围内一个重要的公共卫生问题,防治工作越来越引起公众的关注。寻找灵敏、特异性良好的抗原,对于国内钩体感染的早期诊断有很大帮助。通过基因工程方法,获得表达量高、抗原性好的钩端螺旋体重组抗原,检测国内常见的15群15型钩端螺旋体阳性标准血清,初步验证其抗原性。
方法:用PCR法扩增哥本哈根型钩体LigA基因,与表达载体pET-30a连接,获得LigA重组表达质粒,转化BL21(DE3)宿主菌,IPTG诱导表达。表达产物经亲和层析纯化后,采用western blot和ELISA分析其抗原性。
结果:通过原核表达可以获得高产量的重组蛋白,western blot和ELISA结果显示重组抗原在检测国内常见的15群15型钩端螺旋体阳性标准血清方面具有良好的免疫活性。
结论:可以通过原核表达哥本哈根型钩体LigA基因,获得的重组蛋白可应用于钩体病血清抗体的检测,在钩体病诊断及疫苗研究中具有潜在的应用价值。
钩端螺旋体病;血清抗体;重组蛋白;基因表达
福建医科大学
硕士
营养与食品卫生学
吴小南
2010
中文
R514.401;R392.11
54
2010-12-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)