附桂骨痛复方提取工艺及其初步药效学研究
附桂骨痛复方（FGD）取《金匮要略》乌头汤之精华组方，由附子（制）、川乌（制）、肉桂、党参、当归、白芍（炒）、淫羊藿、乳香（制）8味中药组成。温阳散寒、益气活血、消肿止痛之功效，对于阳虚寒湿型颈椎及膝关节增生性关节炎具有良好的治疗作用，临床试验有效率达95%，是治疗此类疾病的理想药物。但是目前附桂骨痛复方仍是采用传统水煎提法，有效含量低，一次服用的剂量大，质量检测控制有唯成分论之嫌。为克服以上缺点，寻找一条适合工业化生产，并达到减毒增效目的的工艺路线，主要研究内容如下：
⑴有效成分分析方法的确定。根据二帖类生物碱和酸性染料溴甲酚绿在酸性缓冲液中形成的络合物能被氯仿提取，并且提取液在412．5 nm处具有吸收值的原理，用分光光度法测定乌头总生物碱的含量。酸性染料比色法方法准确，可作为附桂骨痛复方的定量测定方法。利用高效液相色谱法测定复方中芍药苷含量。采用乙腈-0．1%磷酸溶液（14：86）为流动相，附桂骨痛复方提取液经过简单处理，就使其中的芍药苷色谱峰与其他杂质峰能够较好的分离，无干扰。该检测方法供试液的处理过程相对简单，提高了检测的效率。
⑵对附桂骨痛复方的提取工艺进行优选。本文研究了三种提取方法：黄酒提取法、半仿生提取法以及微生物发酵提取法。以乌头类总生物碱，芍药苷以及干浸膏得率为考察指标，通过正交设计优选出黄酒提取法，半生提取法的最佳参数分别为：溶剂黄酒的浓度为85%，总煎煮时间为4h，药材不用粉碎（饮片）；3煎用水的pH值分别为即2．0、7．0、8．5，总煎煮时间为3小时。根据综合指标的评价γ值，将以上两种方法与微生物发酵提取法进行比较研究，发现后者γ值最大。该法所得乌头总生物碱含量大于半仿生提取法的2倍。而且微生物发酵提取液比较澄清，可能正是因为此对有效成分有浓缩作用，从而大大提高了中药活性成分的含量。
⑶附桂骨痛复方发酵前后药效学研究。急性毒性实验结果为发酵后附桂骨痛复方灌胃给药的LD50为133．70g·kg-1，远远高于发酵的附桂骨痛复方灌胃给药的LD50为118．16g·kg-1。表明发酵后附桂骨痛复方用药安全性增加。此外，进行小鼠毛细血管通透性和耳廓肿胀抗炎实验；热板法和扭体法镇痛实验，结果表明初步表明发酵后的提取物比未发酵的提取物抗炎镇痛效果有显著的提高，P<0．01，也验证了复方通过发酵有效含量提高，其药效也相应提高的理论。
中药制剂;附桂骨痛复方;药物提取;发酵工艺
北京化工大学
硕士
制药工程
田平芳
2009
中文
TQ461;R284.2
67
2010-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）