山楂蜂花粉多糖提取、分离纯化、结构鉴定和生物活化的研究
近年来，花粉作为优良的全营养食物被全世界广泛关注，掀起一股“花粉研究热”，而且国内对花粉的基础研究和应用研究也已经全面开展，并取得可喜成果，有些方面已进入国际研究的前沿。山楂蜂花粉在中国北方产量巨大，充分利用我国山楂蜂花粉资源，对山楂蜂花粉进行深入系统研究，使这一丰富资源的开发和利用提高到一个新的水平，将会产生极大的经济效益和社会效益。
本文以山楂蜂花粉为原料，采用复合破壁法即采用机械破壁、冷冻破壁和酶法破壁三种方法进行分花粉破壁，以此达到较为理想的破壁效果。同时通过试验设计对热水浸提、乙醇沉淀的工艺进行了优化，最后经过脱蛋白、透析得到多糖粗品(CPP)。CPP通过DEAE Sepharose CL-6B凝胶柱层析进一步纯化得到CPP-1和CPP-2两种组分。经红外光谱检测证实具有多糖类物质的特征吸收峰。然后通过Sephadex G-100凝胶柱层析检测为单一对称峰，并通过高效凝胶色谱测得两者分子量分别为3．7×105Da和7．8×104Da。通过气相色谱测得CPP-1由L-鼠李糖、L-果糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖七种单糖组成，其摩尔比为0．67：0．44：10．16：0．66：1．03：5．51：9．94； CPP-2由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖五种单糖组成，摩尔比为2．12：9．82：3．60：0．89：5．56。经部分酸水解甲基化分析，结合气质联用仪，推断出CPP-1和CPP-2是由1，5-L-Araf残基组成的还原性多糖。
本研究从清除DPPH自由基、抑制羟基自由基的产生和还原力、清除超氧阴离子自由基4个方面研究了CPP、CPP-1和CPP-2的体外抗氧化效果，结果表明粗多糖CPP和纯化组分CPP-1、CPP-2对DPPH自由基的清除作用和羟基自由基的抑制作用明显，与Vc接近，而还原力和清除超氧阴离子自由基的能力低于Vc。免疫活性研究主要通过对巨噬细胞吞噬功能的影响、T淋巴细胞增殖功能的影响和NK细胞毒活性的影响来测定，相对CPP-1而言，CPP-2能显著提高小鼠的非特异性免疫和细胞免疫功能。
全营养食物;山楂蜂花粉;蜂花粉提纯;抗氧化活性
北京化工大学
硕士
制药工程
袁其朋
2009
中文
S896.4;TS201.2
101
2010-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）