PM1降解MTBE的特异蛋白和藻菌混合新工艺的研究
MTBE（Methyl tert-Butyl Ether，甲基叔丁基醚）是一种添加剂，用以提高汽油的辛烷值和燃烧效率，但由于其强水溶性和难降解性，使其成为潜在的地下水污染物质，而引起了世界各国的重视。
本文试图通过考察MTBE降解菌株Methylibium petroleiphilum PM1（PM1）的全细胞蛋白差异，寻找MTBE降解途径的特异蛋白。另外，试图通过考察菌藻混合工艺对该菌降解MTBE效率的影响，寻求PM1高效降解新工艺。
首先，考察了该菌以不同碳源底物（MTBE，TBA和丙酮）培养的全细胞蛋白SDS-PAGE电泳图谱，结果发现以MTBE和TBA为底物培养的PM1菌全细胞蛋白电泳图谱无明显差别，而以丙酮为底物培养的PM1全细胞蛋白电泳图谱与前两者有明显差异，分别在28 KD，42 KD以及66.2 KD处的有特异蛋白条带。选取最明显的差异条带，即28 KD处蛋白条带切割，并经过水平电泳，透析，丙酮沉淀等步骤回收。利用银染和双向电泳检测，发现通过该方法能回收到较为单一的蛋白。通过肽质量指纹谱鉴定后发现回收蛋白与弧菌的连接转移蛋白最为接近。
考虑到PM1为好氧菌，氧气的供给会对该菌降解MTBE起重要作用。故设计进行了密闭系统中PM1菌与小球藻Chlorella ellipsoidea混合光照培养降解MTBE试验，混合培养系统中小球藻的光合作用可为PM1提供氧气，而PM1降解MTBE最终产生CO2可为小球藻生长提供碳源。结果显示密闭光照培养系统中小球藻的存在确实对PM1降解MTBE有一定的促进作用，在168 h时，单菌降解率为60％左右，而藻菌混合体系降解率为100％。同时，比较了不同菌藻比例对降解效果的影响，发现菌藻比100：1的情况下降解MTBE效果最好。
进一步考察了密闭系统中固定化PM1和小球藻混合培养降解MTBE效果。结果发现，高浓度PM1固定化颗粒有良好的降解MTBE能力；藻菌混合固定化降解MTBE效果最好，藻菌分别固定化次之，均优于单菌固定化降解MTBE。
MTBE降解菌株;PM1好氧菌;小球藻;混合培养;生物降解;蛋白电泳图谱
浙江工业大学
硕士
微生物学
钟卫鸿
2009
中文
X703.1;Q949.212
71
2009-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）