高效氯氰菊酯降解菌的分离、鉴定及特性研究
从茶园、田地、桔园等常施用农药的环境中采集多份土壤样品，以高效氯氰菊酯为碳源构成选择压力，经液体摇瓶富集和多平板联用两种筛选程序，共筛选了280株微生物，获得9株高效氯氰菊酯降解菌。高效氯氰菊酯降解菌培养6d后，对100 mg/L的底物，降解率均可达到60％左右；各菌株的菌落形态差异较大；经简单染色、革兰氏染色后观察菌体形态为杆状、短杆状，均为革兰氏阴性。挑选三株菌落形态有代表性的高效氯氰菊酯降解菌进行16S rDNA测序及比对，其中两株属于假单胞菌属（16S rDNA序列同源性为98％～99％），一株属于根瘤菌属（16S rDNA序列同源性为98％～99％）。根瘤菌属微生物降解高效氯氰菊酯尚属首次报道。将此菌株命名为CY22-7.3，并进一步研究其降解特性。
菌株CY22-7.3在无额外营养物质情况下，经100mg/L高效氯氰菊酯诱导，培养24 h后进入降解阶段；培养6d后，降解了约60％的高效氯氰菊酯。在添加了外源营养物质（如，酵母提取物）后，降解率提升至80％左右。菌株能耐受的底物浓度在200 mg/L～300 mg/L之间，对联苯菊酯降解率较低；最佳的降解pH在6.0左右，较好的通气条件能够大幅度促进高效氯氰菊酯的降解；温度适应范围广，20℃～30℃均能保持较强的降解能力。
经超声波破碎提取胞内粗酶液；硫酸铵沉淀胞外蛋白，经透析除盐后作为胞外粗酶液。两者同时于30℃水浴中作用于50 mg/L高效氯氰菊酯8h，结果胞内粗酶液降解了约40％的高效氯氰菊酯，而胞外粗酶液降解了约6％的高效氯氰菊酯。说明降解酶属于胞内酶。
最后，按照文献中检测质粒的方法验证，发现菌株CY22-7.3不包含质粒。
高效氯氰菊酯;根瘤菌;生物降解;胞内酶
浙江工业大学
硕士
微生物学
裘娟萍;崔志峰
2009
中文
Q935;Q93-3
59
2009-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）