红树植物内表生放线菌的分离、活性筛选和次级代谢产物研究
天然产物是药物的重要来源。放线菌(Actinomycetes)在产生抗生素方面具有独特的优势，大约75％的抗生素都是由放线菌产生，从植物内生放线菌的次级代谢产物中，可以分离到许多结构新颖，生物活性多样的化合物。红树植物生长于海岸潮间带，其独特的生存环境赋予它丰富的微生物资源，是当前倍受重视的药用新资源。
本论文对采集自福建省漳州市浮宫镇九龙江口、福建省厦门市集美和海沧三个地点的两种红树植物(秋茄和桐花树)的叶部和根部进行内表生放线菌的分离，共得到55株放线菌。
以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、大肠杆菌(Eschenchia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphlococcus aureus)、短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)、白色假丝酵母(Candida albicans)和黑曲霉(Aspergillus niger)为指示菌，采用双层琼脂扩散法对这些菌株进行抗菌活性检测，共筛选得到活性菌株26株，占总菌株数的47.3％，其中主要是抗革兰氏阳性细菌的活性；采用MTT法对其体外抗肿瘤活性进行检测，发现5株放线菌对Hela(人子宫癌细胞)和HepG2(人肝癌细胞)具有相对较高抑制作用，占总菌株数的9.1％。
通过16S rDNA的序列分析，对所分离菌株进行了分子鉴定，结果表明只有一株放线菌属于拟诺卡氏菌属(Nocardiopsis)，其他均为链霉菌属(streptomyces)。通过对分离菌株进行AHBA引物筛选，有6株放线菌筛选结果为阳性，表明这6株菌的DNA中可能含有AHBA(3-氨基-5-羟基苯甲酸)合成酶基因，其中包括拟诺卡氏菌。
本论文对该株拟诺卡氏菌(3号菌)和另一株具有较高抗菌和抗肿瘤活性的链霉菌(18号菌)的次级代谢产物进行了初步的研究。从3号菌株的次级代谢产物中分离并鉴定了13个化合物，其中3个为新化合物(3C、3Y-10)，属于吡喃酮类化合物；10个为已知结构的化合物(3A、3Y-5、3Y-7、3Y-14、3L-A、3L-M、3L-G、3Y-18、3Y-19、3Y-20)：3A、3Y-5、3Y-7和3Y-14为色氨酸的衍生物；3L-A为邻氨基苯甲酸甘油酯；3L-M为水杨酰胺类化合物；3L-G为乙酸甘油酯；3Y-18为乙酰酪胺；3Y-19和3Y-20为环二肽。从18号菌株的次级代谢产物中分离并鉴定了4个已知结构的化合物(18-C、18-F、18-E、18-G)，分别为对羟基苯乙酸甲酯、α-酮戊二酸二甲酯、2，6-二脱氧吡喃糖苷、2，6-二脱氧吡喃糖。对分离到的新化合物3C的抗菌活性及抗肿瘤活性进行了研究，在每片滤纸片含有50μg样品(滤纸片法)时对5种指示菌没有显示出抗菌活性；抗肿瘤实验结果显示，3C对Hela细胞只有轻微的抑制作用，在10ug/mL和20ug/mL两种浓度时的抑制率分别为2.73％和7.39％。
本文结果表明，红树林放线菌中蕴藏着较丰富的抗菌和抗肿瘤活性物质产生菌，同时也蕴藏着较丰富的结构新颖的活性物质，是开发抗菌抗肿瘤等药物的潜在资源。
红树植物;内表生放线菌;生物活性;次级代谢产物
厦门大学
硕士
微生物学
沈月毛
2009
中文
R284
88
2009-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）