哮喘患者肺部γδT淋巴细胞的变化和对气道炎症的影响
目的：
1、探讨哮喘患者肺部γδT淋巴细胞数量的变化。
2、探讨哮喘患者肺部γδT淋巴细胞增殖活性的变化。
3、评估磁性细胞分选器(MACS)纯化支气管肺泡灌洗液中γδT淋巴细胞的效果。
方法：
1、收集哮喘和对照患者的支气管肺泡灌洗液。
2、显微镜下观察支气管肺泡灌洗液中的细胞密度。
3、对支气管肺泡灌洗液中的细胞进行分类计数。
4、利用流式细胞术检测支气管肺泡灌洗液中γδT细胞的比例。
5、用磁性细胞分选器纯化支气管肺泡灌洗液中的γδT淋巴细胞。
6、通过台盼兰染色、荧光显微镜和流式细胞术来评估MACS纯化支气管肺泡灌洗液中γδT淋巴细胞的效果。
7、对纯化的γδT淋巴细胞进行体外培养，通过MTT比色法检测γδT淋巴细胞的增殖活性。
结果：
1、在纯化细胞之前，对支气管肺泡灌洗液中的细胞进行计数，哮喘患者组支气管肺泡灌洗液中的细胞密度为(22.5±4.5)×104个/毫升，高于对照组的(18.8±3.7)×104个/毫升，差异不显著(t=1.665、P>0.05)。
2、显微镜下对细胞进行分类计数，哮喘组的巨噬细胞比例为(81±4)％，低于对照组的(86±2)％，有统计学差异(t=3.122、P<0.01)；哮喘组的淋巴细胞比例为(15±3)％，高于对照组的(13±2)％，但无统计学差异(t=1.490、P>0.05)；哮喘组嗜酸性粒细胞的比例(3％)高于对照组(<1％)；而中性粒细胞的比例(1％)也略高于对照组(<1％)。
3、流式细胞术检测表明，哮喘患者组支气管肺泡灌洗液中γδT淋巴细胞的百分率为(6.39±0.71)％，高于对照组的(2.62±0.37)％，差异显著(t=12.449、P<0.01)。
4、MACS纯化支气管肺泡灌洗液中的γδT淋巴细胞后，在荧光显微镜下观察，γδT细胞的比例明显增加，其它细胞基本消失。流式细胞术检测表明，γδT淋巴细胞的比例>93％。台盼兰染色表明，细胞存活率>95％。
5、MTT法检测γδT淋巴细胞的增殖活性，哮喘患者组的OD值为0.201±0.024，高于对照组的0.155±0.032，差异具有显著性(t=3.042、P<0.05)。
结论：
1、哮喘患者肺部γδT淋巴细胞的比例明显升高。
2、哮喘患者肺部γδT淋巴细胞的增殖活性显著增强。
3、MACS可以有效地纯化支气管肺泡灌洗液中的γδT淋巴细胞，且不会对γδT淋巴细胞造成明显损伤。
支气管哮喘;γδT淋巴细胞;支气管肺泡灌洗;气道炎症
清华大学医学部;北京协和医学院;中国医学科学院
硕士
内科学(呼吸)
郭子建
2008
中文
R562.25
68
2009-09-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）