多重耐药鲍曼不动杆菌AdeABC外排机制研究
近年来非发酵菌在临床分离中呈增加趋势，其中最主要菌种为不动杆菌属细菌和铜绿假单胞菌，而不动杆菌中又以鲍曼不动杆菌最为常见。鲍曼不动杆菌已成为继铜绿假单胞菌之后的重要临床分离菌。
近几年来，多重耐药鲍曼不动杆菌已经在全球各地出现播散，甚至造成了爆发流行，并且伴随着耐药性的不断增强。既往碳青霉烯类抗生素被认为是治疗不动杆菌重症感染的首选抗生素，而新型甘氨酰环类药物替加环素的开发对治疗MDRAB也被寄予了很大的希望。然而有关碳青霉烯类抗生素耐药不动杆菌已经开始出现和流行，甚至泛耐株的出现，给临床抗感染治疗带来了很大的困难，也对院内感染的控制提出了新的要求。药物的主动外排系统是造成细菌多重耐药的一个重要原因，近年来越来越引起重视。2001年法国学者在鲍曼不动杆菌中发现了AdeABC外排泵系统，它介导了氨基糖甙类，氟喹诺酮类，头孢噻肟，四环素，米诺环素，红霉素，氯霉素，甲氧苄啶等耐药。最新研究又发现，它的过度表达还在介导鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素和替加环素的耐药中发挥重要作用，对多重耐药鲍曼不动杆菌新发现的耐药机制进行研究，以指导临床医生的用药及流行的控制。
本研究收集2004年12月到2005年12月临床分离的鲍曼不动杆菌700株，根据前期药敏试验及地区、克隆分布选择其中101株多重耐药株及12株敏感鲍曼不动杆菌进行研究。
研究内容：
1.对3种抗生素包括亚胺培南、美罗培南，替加环素进行外排泵抑制剂PApN(phe-Argβ-naphthyl-amide，又名MC207110)抑制实验，了解外排表型；
2.利用PCR扩增技术对外排泵耐药基因adeA、adeB、adeC及其调控基因adeS、adeR进行筛选，探讨基因分布及基因型在克隆中的分布特征。
3.利用实时荧光定量聚合酶链反应(real time PCR，RT-PCR)技术测定adeB的表达情况，并探讨其与外排表型，基因型及耐药之间的关系。
通过以上研究得到我国MDRAB菌株AdeABC外排系统与多重耐药的关系，对亚胺培南、美罗培南，替加环素3种抗生素耐药的介导作用。
研究结果：
1.我国鲍曼不动杆菌中，AdeABC外排泵基因不仅在耐药菌中，在敏感菌中存在率也高，而且地区分布和克隆分布十分广泛。调控基因adeS、adeR在敏感菌株中阳性率较低。
2.我国MDRAB中，AdeABC外排泵系统的过度表达介导了其对亚胺培南耐药，并可能和美罗培南、替加环素耐药有关。在同样的外排泵抑制条件下，外排表型越明显，提示AdeB表达率越高。
3.外排泵抑制剂PApN在50mg/L工作浓度下，对碳青霉烯类抗生素MIC下降大于等于4倍可以认定外排表型阳性；PAβN在50mg/L浓度下不能抑制外排泵对替加环素的外排作用。
细菌多重耐药;鲍曼不动杆菌;抗生素;AdeABC外排机制;耐药基因
浙江大学医学部;浙江大学;浙江大学医学院
硕士
内科学
俞云松
2009
中文
R516;R978.1
57
2009-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）