AcMNPV 38K的表达纯化及功能研究
38K基因是杆状病毒的核心基因，缺失其会导致核衣壳装配中断，不产生子代病毒。苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒（Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus，AcMNPV）的38K为核衣壳蛋白组分，可与其自身及某些核衣壳蛋白相互作用。38K保守的氨基酸序列中含有Haloacid Dehalogenase超家族的特征结构域，可能属于一种具体功能未知的磷酸酶。为进一步探讨38K的功能，揭示其在病毒包装复制过程中的作用机理，本论文继续对AcMNPV38K进行研究。
软件预测显示杆状病毒38K蛋白具有保守的二级结构，而序列中的非保守区域可能与底物识别有关。
利用原核表达系统在大肠杆菌中分别表达出了融合GST或Trx的全长38K蛋白，以及融合Trx的38K羧基段肽段。可溶性分析显示，融合蛋白主要以包涵体形式表达，可溶蛋白含量很少。
利用Bac—to—Bac昆虫细胞真核表达系统，成功表达出带组氨酸标签的38K蛋白并对其纯化条件进行初步优化。用pNPP水解法对纯化38K蛋白和感染病毒后的Sf9细胞内磷酸酶活性进行鉴定，结果显示昆虫细胞中表达出来的38K不具有pNPP磷酸水解酶活性。
杆状病毒;核心基因;38K蛋白;磷酸酶;融合蛋白;苜蓿丫纹夜蛾;亲和层析;核多角体病毒
中山大学
硕士
微生物学
庞义
2009
中文
Q936
85
2009-09-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）