小曲中优良根霉的分离筛选及产酶条件研究
我国小曲资源丰富，构成了一个巨大的微生物菌种库，里面蕴藏着许多质量优良的菌种。本文以收集的传统小曲为样本，分离并纯化其中的根霉，筛选得到了ERh203和ERh505两个优良菌株，同时研究了其产酶特点，优化了制曲条件，并完成了对菌株的鉴定工作。实验结果如下：
(1)通过对8种传统小曲样品的分析发现：曲2糖化力和液化力最高，蛋白酶活力也较高，而曲5具有最高的蛋白酶活力，糖化力和液化力也相对较高，从这两种小曲中分离纯化并得到了12株根霉。通过制曲和糯米试饭试验，比较了各菌株的产酶特点，筛选出了ERh203和ERh505两株优势根霉。同时发现，这两株根霉都具有一定的产酒精能力，这也是优良根霉的重要特点之一。
(2)单因素试验表明，培养时间对两株根霉产酶有较大的影响，培养3-4天有利于根霉的生长和酶活力的提高。同时，温度也影响着根霉的产酶情况，在30℃时，糖化酶和液化酶活力较高，而蛋白酶活力则在26℃下培养时却达到最大值。在pH5.2-pH7.0之间，根霉产酶活性比较稳定。在麸皮培养基中添加一定量的玉米粉能显著提高根霉的产酶能力，当玉米粉浓度为8％-12％时，酶活力都有不同程度的增加。ERh203在玉米粉浓度为8％时，糖化酶活力和液化酶活力都达到最大，分别为919.37 mg/h·g-1和648.64 mg/h·g-1，分别增加了6.7％和5.4％，蛋白酶活力在添加12％玉米粉时达到最大值860.74μg/min·g-1，增加了5.9％。
(3)正交试验结果表明：培养温度、培养时间、玉米粉浓度对菌株ERh203产糖化酶、液化酶和蛋白酶的活性的影响显著。对糖化酶的影响顺序是培养温度＞培养时间＞玉米粉浓度，最佳条件是培养温度30℃、培养时间3d和添加玉米粉浓度8％。对液化酶的影响是培养时间＞培养温度＞玉米粉浓度，最佳条件是温度30℃、时间3d和玉米粉浓度8％。对蛋白酶的影响是培养时间＞培养温度＞玉米粉浓度，最佳条件是培养温度28℃、培养时间4d和玉米粉浓度12％。
(4)通过显微镜下菌落形态，如菌丝、假根、孢子囊、孢囊孢子、厚垣孢子等的观察和测量，结果为：ERh203是藻状菌纲(Phycomycetes)毛霉目(Mucorales)毛霉科(Mucoraceae)根霉属(Rhizopus Ehrenberg)中的米根霉(Rhizopus oryzae Went et Prinsen Geerlings)，ERh505是藻状菌纲(Phycomycetes)毛霉目(Mucorales)毛霉科(Mucoraceae)根霉属(Phizopus Ehrenberg)中的河内根霉(Rhizopus tonkinensis Vuill)。
小曲;根霉;菌株分离;菌株筛选;产酶条件
西南大学
硕士
微生物学
张惟广
2009
中文
TQ925.7;Q949.327.1
43
2009-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）