5年间鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶特性与耐药相关性研究
目的：
1.了解温州医学院附属第一医院2002～2006年鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药情况，为临床药物选择提供依据。
2.研究2002～2006年每年3～5月临床分离鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶的分布与变迁情况及其与碳青霉烯类抗生素耐药的关系。
方法：
1.回顾性调查2002年1月～2006年12月间临床分离鲍曼不动杆菌的临床分布情况，琼脂扩散法检测鲍曼不动杆菌对头孢他啶、头孢曲松、阿米卡星和环丙沙星的耐药性，琼脂稀释法检测业胺培南的最低抑菌浓度(MIC)。
2.挑选2002～2006年每年3～5月共174株鲍曼不动杆菌，琼脂稀释法检测鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美洛培南的MIC值。PCR检测碳青霉烯酶基因(IMP、VIM、OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXh-58)和插入序列ISAbal，对OXA-51阳性菌株进行测序确定基因业型。粗提酶三维水解试验比较OXA-23、OXA-51对亚胺培南的水解能力。接合传递试验探讨OXA-23、OXA-51基因定位(染色体或质粒)。
结果：
1.5年间分离的865株鲍曼不动杆菌主要来源于呼吸道标本，占75.7％(655/865)，且主要集中于监护病房和神经外科等科室；鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物的耐药性逐年上升，亚胺培南敏感株的MIC值也呈逐年上升趋势。
2.2002～2006年每年3～5月问临床分离的鲍曼不动杆菌，对业胺培南的耐药率分别为0％(0/20)、2.6％(1/38)、0％(0/36)、27.9％(12/43)和59.5％(22/37)，对美洛培南的耐药率分别为0％(0/20)、2.6％(1/38)、0％(0/36)、20.9％(9/43)和54.1％(20/37)，呈逐年上升趋势，尤其是06年对业胺培南、美洛培南耐药的鲍曼不动杆菌达到近60.0％。
3.IMP、VIM、OXA-24和OXA-58均未检测到，检测到OXA-23阳性31株占17.8％(31/174)，OXA-51阳性122株占70.1％(122/174)，31株OXA-23阳性菌株OXA-51也全阳性，OXA-23的阳性率从2002年的0％上升到2006年的59.5％，OXA-51的阳性率从2002年的30％上升到2006年的86.5％。31株OXA-23阳性菌对亚胺培南和美洛培南的MIC值都≥16μg/ml，仅OXA-51阳性的菌(91株)除3株对亚胺培南的MIC值等于16μg/ml外，其余88株都≤8μg/ml。OXA-23阳性菌耐药性明显高于仅OXA-51阳性菌株。OXA-51阳性菌和阴性菌对业胺培南和美洛培南的MIC值分布也存在差异，OXA-51阳性菌对亚胺培南和美罗培南的MIC值普遍高于OXA-51阴性(P＜0.005)。
4.122株OXA-51样阳性菌株经测序、Blast比对后，共有15个不同的业型，OXA-66型占81.1％(99/122)，其他基因型占18.9％(23/122)，包括OXA-64、OXA-65、OXA-68、OXA-98、OXA-106、OXA-121、OXA-123、OXA-124、OXA-126、OXA-127各1株，OXA-120、OXA-125各2株，OXA-122和OXA-69分别为3株和5株，其中OXA-120～OXA-127为本次研究发现的8个OXA-51群新基因型，对应的核苷酸序列已在GenBank登陆，登陆号为EU255289～EU255296。将仅OXA-51样阳性菌(91株)分为OXA-66和非OXA-66两组比较，OXA-66的菌株对头孢他啶、头孢曲松、环丙沙星、阿米卡星的耐药率均大于90％，明显高于非OXA-66组，OXA-66组对亚胺培南和美罗培南对的MIC值也高于非OXA-66组(P＜0.05)。
5.0XA-51阳性的122株菌，PCR检测了插入序列ISAbal，ISAbal阳性103株占84.4％(103/122)，98.1％(101/103)的菌株对亚胺培南MIC值≥lug/ml，19株ISAbal阴性菌对亚胺培南、美洛培南MIC值均≤0.5ug/ml。68株OXA-66的菌株都检测到了ISAbal而23株非BOXA-66的菌株仅有4株检测到了ISAbal。
6.粗提酶三维水解试验显示，OXA-23阳性菌粗提酶能明显水解亚胺南，OXA-51阳性菌粗提酶对亚胺培南的水解不明显。
7.0XA-23和OXA-51阳性菌接合传递试验均未见接合子生长，接合试验阴性。
结论：
1.5年来，鲍曼不动杆菌的感染率和耐药性明显升高，且有继续上升趋势。
2.鲍曼不动杆菌中OXA-23、OXA-51的检出率及其对碳青霉烯类抗生素的耐药性均呈上升趋势；产OXA-23型β-内酰胺酶是本院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的重要原因。
3.本院OXA-51样基因种类丰富，OXA-66为本院分离鲍曼不动杆菌产OXA-51样碳青霉烯酶的主要基因型，发现了8个新的OXA-51样碳青霉烯酶基因。
4.OXA-51群中的OXA-66介导的碳青霉烯类低水平耐药，这一作用可能是通过插入序列ISAba/插入OXA-66基因上游启动子序列导致OXA-66过表达所致。
鲍曼不动杆菌;碳青霉烯酶;抗生素;耐药性
温州医科大学;温州医学院
硕士
临床检验诊断学
周铁丽;包其郁
2008
中文
R378
49
2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）