精子荧光原位杂交分析男性染色体相互易位携带者的减数分裂分离结果
研究目的：
染色体易位是最常见的染色体结构异常。男性染色体易位携带者可通过影响精子生成过程而导致少、弱精子症或无精子症，还可引起配偶反复流产甚至出生染色体异常婴儿。染色体易位在减数分裂时会产生高比例的不平衡的配子，其发生频率与其生殖遗传风险呈现正相关，而与胚胎植入前遗传学诊断的成功率呈现负相关。
精子减数分裂分离结果分析是研究染色体易位减数分裂规律的手段之一，可以获得准确的平衡和不平衡精子发生频率。本研究对4例染色体相互易位男性的精子采用荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization，FISH)进行精子染色体分析减数分裂分离结果的分析，并结合文献讨论了精子FISH分析的意义。
材料与方法：
病例A、B、C和D的染色体相互易位核型分别为46，XY,t(2；18)(p16；q23)、46，XY，t(4；6)(q34；q21)、46，XY，t(8；13)(q23；q21)和46，XY，t(4；5)(4q31；5q13)。每例携带者手淫获取精液，常规离心处理后涂片，用乙醇：乙醚(1:1)固定精子，使用5NNaOH使精子头染色质去浓缩，经杂交前处理后行单次多色FISH。每个病例在其2条易位染色体断裂点两侧的2个近端和2个远端等4个染色体区域中选用位于其中3个区段的着丝粒、特异位点或端粒探针。在3个病例中，3个区段中的1个区段采用同一位点的但分别标有红色和绿色的2个探针，以产生一个重叠的橙色信号与红色和绿色相区别。4个病例采用了不同类型的探针组合。FISH杂交后通过荧光显微镜观察其不同的信号特点确定各种分离类型精子的发生频率。
结果：
不同病例之间的各种分离类型精子的发生频率不同。病例A、B、C和D的对位分离精子分别占27.1％、45.7％、31.2％矛149.4％，邻位-1分离精子分别占26.95/0、37.6％、30.7％和37.5％，邻位－2分离精子占7.3％、6.0％、15.7％和2.7％，3:1分离精子分别占33.7％、8.6％、18.8％和9.3％，减数分裂Ⅱ不分离精子占1.9％、0.2％、0.6％和0.6％，4:0或二倍体精子占0.4％、0.3％、0.2％和0.1％。每个病例的不同分离类型精子的发生频率也不同，病例A的最多的精子类型是3:1分离精子，病例B、C和D最多的精子类型依次是对位和邻位-1。
结论：
1、精子FISH可以有效地区分染色体易位的对位、邻位-1、邻位-2、3:1和4:1分离等主要分离方式。
2、染色体易位在减数分裂分离过程中，其不同分离方式的发生频率是不同的。
3、对位和邻位-1分离可能是大多数易位的主要分离方式，但在一些易位类型中，3:1分离精子可能成为主要的分离方式。
4、不同的男性染色体相互易位携带者减数分裂的分离结果可能不同，有必要对其行精子FISH分析以获得准确的平衡和不平衡精子的发生频率，从而有助于提供更准确的遗传咨询和行胚胎植入前遗传学诊断的预后估计。
染色体易位;男性染色体;精子;荧光原位杂交;减数分裂分离
温州医科大学;温州医学院
硕士
妇产科(生殖内分泌)
叶碧绿
2007
中文
R698
28
2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）