HIF和VEGF在低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的调控作用
目的：观察低氧诱导因子－1α(HIF－1α)蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在低氧高二氧化碳性肺动脉高压小鼠肺内的表达。探讨HIF和VEGF在其中的调控作用。
方法：建立低氧高二氧化碳性肺动脉高压小鼠模型，SPF级雄性C57BL/6小鼠16只，随机分为正常对照组(C组)、低氧高二氧化碳4周组(H组)，每组8只。将H组小鼠置于常压低氧高二氧化碳动物饲养舱内，维持舱内氧浓度在9％～11％，二氧化碳浓度为5％～6％，保持舱内温度为22℃～26℃。实验组在氧舱内连续4周，每天8小时，每周6天。为了使动物能适应，每次氧浓度从21％降至10％的时间控制在15min～20min，二氧化碳浓度升高至5％的时间控制在30min。C组小鼠为室内饲养，其他条件同H组。动物饲养到相应时间点后，用戊巴比妥钠(35mg/kg)腹腔注射麻醉，参照YanliSong等报道的右心导管插入术，用1.4F标准的Millar超微压力导管(型号为SPR-835)测右心室收缩压。导管末端连接Medlab生物信号采集处理系统，根据监视器所显示的血压值与压力曲线波型的移行变化判断导管尖端的位置。待导管进入右心室后，测定并记录右心室收缩压。测压后开胸取心，剪去心房组织，再沿室间隔剪开，将右心室(RV)和左心室加室间隔(LV+S)分离，用滤纸吸干血液后分别称重，以RV/(LV+S)重量比作为评价右心室肥大指标。取每组小鼠的右心室和肺组织块，甩4℃4％多聚甲醛固定4h，然后脱水、石蜡包埋、切片，HE染色，光镜下观察其病理学改变。应用免疫组化技术检测正常对照组和低氧高二氧化碳4周组小鼠模型肺小动脉上HIF-1α蛋白和VEGF蛋白的表达，用图象分析软件测取所选血管管壁平均吸光度值(AOD)作为肺动脉管壁HIF-1α蛋白和VEGF蛋白的相对含量。
结果：H组小鼠右心室收缩压明显高于C组(P＜0.01)，且右心室重量比RV/(LV+S)亦有增加(P＜0.01)。光镜下肺细小动脉管壁增厚，中膜平滑肌细胞肥大增生合并管腔变窄。免疫组织化学显示：H组小鼠肺细小动脉HIF－1α蛋白和VEGF蛋白均呈阳性表达；C组多数阴性表达或弱阳性表达；H组小鼠肺细小动脉HIF-1a蛋白和VEGF蛋白免疫组化吸光度高于对照组(P＜0.01)；VEGF蛋白与HIF-1a蛋白表达呈正相关(r为0.742，P＜0.01)。
结论：慢性低氧高二氧化碳使HIF-1α蛋白和VEGF蛋白在肺细小动脉表达增加，二者参与小鼠肺动脉高压形成，推测HIF-1α蛋白可能以转录激活的形式上调VEGF基因，使VEGF蛋白表达增加，可能导致肺动脉高压发生和发展。
肺动脉高压;低氧高二氧化碳;右心室;免疫组织
温州医科大学;温州医学院
硕士
内科学
王小同;戴元荣
2007
中文
R541.1
34
2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）