灯盏花素诱导血管化口腔黏膜的组织工程构建
组织工程构建物血管化是制约组织工程构建物进入临床的关键问题之一，血管化的目的是建立宿主和组织工程构建物的血液流通，提高细胞的生存能力。鉴于血管化与组织工程构建物的密切关系，本研究运用灯盏花素进行促进组织工程化口腔黏膜构建物血管化分析，并明确灯盏花素在促进血管化过程中的可能机制，寻找新的简便、高效具有较好临床应用前景的促血管化方法。
研究目的：
1.优化口腔黏膜细胞培养方法，为组织工程构建提供所需的种子细胞；比较聚羟基乙酸、医用胶原膜、瑞诺组织补片构建组织工程化口腔黏膜的优劣；
2.比较研究不同浓度灯盏花素对聚羟基乙酸和医用胶原膜血管化的不同影响；
3.探讨并比较不同浓度灯盏花素促组织工程化口腔黏膜构建物血管生成的作用机制。
研究方法：
1.选择正常人口腔黏膜，通过二次酶消化法和组织块培养法法获取种子细胞，与不同支架材料复合培养组织工程化口腔黏膜。通过组织病理学和免疫组织化学观察并比较种子细胞和组织工程化口腔黏膜构建物。
2.分别通过Masson三色染色、免疫组织化学染色和RT-PCR方法，检测不同浓度灯盏花素对聚羟基乙酸和医用胶原膜血管化的影响。
3.通过CD31免疫组织化学染色和VEGF的RT-PCR方法，检测不同浓度灯盏花素对组织工程化口腔黏膜构建物血管化的影响，以了解灯盏花素影响组织工程化口腔黏膜构建物血管化的作用机制。
研究结果：
1.聚羟基乙酸和医用胶原膜组织工程支架材料较瑞诺组织补片更适合构建组织工程化口腔黏膜。
2.不同浓度灯盏花素和bFGF都不能促进胶原膜血管化。随着聚羟基乙酸回植时间延长，高浓度灯盏花素组的血管密度明显高于阴性对照组(P＜0.05)，高浓度灯盏花素能持续促进聚羟基乙酸血管化。随着灯盏花素的浓度升高，VEGF蛋白和核酸表达在聚羟基乙酸支架材料内血管中表达有上升趋势，且与灯盏花素浓度增加成正比。
3.高浓度灯盏花素组的组织工程支架材料PGA中的炎症细胞明显低于阴性对照组和阳性对照组(P＜0.05)，差别有统计学意义。
4.高浓度灯盏花素组织工程化口腔黏膜构建物的血管数比阴性对照组多(P＜0.05)，差别有显著意义。
结论：
1.医用胶原膜、聚羟基乙酸等构建组织工程化口腔黏膜的不同支架材料各有优缺点。
2.灯盏花素在不同支架材料构建的组织工程化口腔黏膜构建物的血管化方面作用不尽相同，其中在促进支架材料聚羟基乙酸血管新生的同时，能明显减少聚羟基乙酸的炎症反应。
3.高浓度的灯盏花素能显著促进组织工程化口腔黏膜构建物的血管化，CD31和VEGF的产生和上调可能是灯盏花素促进血管内皮细胞形成血管的一种作用机制。
口腔黏膜;灯盏花素;组织工程
上海交通大学
博士
口腔临床医学
周曾同
2008
中文
R286;R988.2
85
2009-03-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）