高三尖杉酯碱抗人乳腺癌细胞的实验研究及其含量测定
高三尖杉酯碱系我国研制成功的高效抗肿瘤药。该药物能使核糖体解聚,抑制蛋白质合成,使肿瘤细胞减少,瘤组织核酸含量下降,研究显示高三尖杉酯碱对多种肿瘤有抑制作用,但对乳腺癌的研究尚未见报道,本文用体外人乳腺肿瘤细胞培养的方法,观察了高三尖杉酯碱对人乳腺癌细胞MDA-MB-453的抑制和诱导凋亡作用,以挖掘治疗乳腺癌的新药物。而提一克分析纯的高三尖杉酯碱,需要近吨的三尖杉,一公斤该碱价值70万美金,经济价值极高。因此,本文还探讨了高效毛细管电泳用于检测高三尖杉酯碱含量的新方法, 为高三尖杉脂碱类药物有效成分含量的鉴定提供一定的依据。
高三尖杉酯碱抗乳腺癌作用的初步研究实验
(1)高三尖杉酯碱对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453的生长均有抑制作用,呈时间、剂量依赖关系,对MDA-MB-453细胞的IC50值为92μg/ml。
(2)台盼蓝染色检测结果表明,高三尖杉酯碱20～80μg/ml作用于MDA-MB-453细胞24小时,细胞死亡率随药物浓度的增大而升高,而空白组活细胞率为98％,结果表明高三尖杉酯碱能够抑制人乳腺癌细胞生长。
(3)MTT检测结果表明,高三尖杉酯碱10～160μg/ml作用于MDA-MB-453细胞24-72小时,细胞凋亡率随药物浓度的增大而升高。结果显示高三尖杉酯碱能够诱导人乳腺癌细胞死亡。
(4)高三尖杉酯碱120μg/ml作用于MDA-MB-453细胞24h采用透射电镜观察可以发现细胞出现凋亡的形态学变化。
毛细管电泳法测定高三尖杉酯碱注射液的含量
(1)建立了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量测定的高效毛细管电泳法。磷酸二氢钠-硼砂为电泳介质,乙醇为有机添加剂,在20kV高压,pH 6.98,25℃的条件下检测了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量。
(2)在最佳的试验条件下,药物浓度为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y)之间呈现良好的线性关系,该法的线性范围为0.005～0.080mg/L。着重探讨了缓冲溶液浓度、种类、酸碱度及温度、其操作电压对检测的影响,结果表明毛细管电泳法测定高三尖杉酯碱注射液的含量,不仅操作简单、准确,而且重复性好。
抗肿瘤药;高三尖杉酯碱;乳腺癌;细胞凋亡;毛细管电泳法
安徽农业大学
硕士
基础兽医学
文汉
2008
中文
R979.1
43
2009-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）