茴脑生物催化合成茴香醛及其生物转化体系分析方法的构建
本文开展茴脑生物降解过程及其生物转化体系的产物分析方法研究,通过筛选合适微生物菌株,使茴脑选择性转化为茴香醛,为今后生物法合成茴香醛提供理论基础。
取得的主要研究成果如下:
(1)确定了薄层层析定性检测茴脑、茴香醛、茴香酸的方法,分析条件为:展开剂为石油醚∶氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸=25∶10∶3∶0.2(v/v/v/v),该法能快速检测三种化合物。
(2)确立高效液相色谱法定量检测茴脑、茴香醛、茴香酸三元混合体系的色谱条件为:流动相为乙腈/水/冰醋酸(体积比为70∶30∶0.02),流速为0.8mL·min-1,检测波长为260 nm,该法能准确定量分析三种化合物。
(3)建立了茴香醛、茴香酸二元体系的紫外分光光度法。利用紫外分光光度法等吸收点确立了茴香醛、茴香酸的定量分析方程分别是p(茴香醛)=A290-0.0064/0.0775,p(茴香酸)=A260-A292/0.0775,该法能简便快速准确定量分析两种化合物。
(4)创造性地开展了茴脑生物降解微生物筛选。对八角果、枝和叶,八角树下土壤、八角中试车间附近土样及茴油提取废液进行了茴脑生物转化生成茴香醛菌株的筛选,筛选到了具有使茴脑很好降解的ZJ-9菌株,初步鉴定ZJ-9菌株为黑曲霉。对菌株ZJ-9的培养条件进行了优化,确定了黑曲霉ZJ-9发酵的最佳接种量为孢子数4.0×105个;最佳发酵温度为30℃;500mL的三口瓶里最佳装液量100mL;摇床转数为200r·min-1;初始pH值以6.0为最优,培养时间及发酵时间各为3d。
(5)实现了茴脑高转化率降解。经对菌株ZJ-9发酵培养基的优化:茴脑的降解度可达82.03%,茴香醛的摩尔转化率可达4.54%。
(6)完成了茴脑生物降解体系关键中间体的结构表征。采用色谱法对转化过程生成关键中间体进行了单离,用IR、GC-MS、NMR对其进行了结构表征,结果表明该化合物是茴香二醇,为推测茴脑生物降解途径提供可靠的依据。
茴香醛;茴脑;生物降解;生物转化体系;生物催化合成;色谱法;紫外分光光度法
广西大学
硕士
分析化学
刘雄民
2008
中文
TQ244.1;X783
65
2008-11-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)