猪繁殖与呼吸综合征病毒E基因重组质粒的免疫效果研究
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种严重危害养猪业的传染病,主要引起母猪繁殖障碍和仔猪及生长猪呼吸系统疾病。PRRS病毒(PRRSV)E蛋白是主要的免疫原性蛋白,含有与病毒中和作用相关的表位,在免疫反应中起重要作用。PRRSV E基因被认为是亚单位疫苗、重组活载体疫苗和DNA疫苗的首选基因。
为了探讨PRRSV E基因的免疫原性,即研究其是否能刺激机体产生特异性抗体与中和抗体,本研究应用了本实验室构建的表达PRRSV E基因的真核表达质粒pIRES-E,经转化后,大量抽提质粒,并用质粒pIRES-E、空载体pIRESneo、生理盐水和不同剂量的PRRS弱毒苗分别免疫家兔。另外,用PRRS病毒GXA株接种于长成单层的Marc-145细胞,待出现病变后,收获病毒,测其病毒的滴度(TCID50)。本研究挑取18只体重1.5-2.0 kg的雄性健康家兔,随机分5组,pIRES-E、空载体pIRESneo组各4只,分别注射质粒200μg/只;生理盐水组4只,注射1 mL/只;1/4头份PRRS弱毒苗组3只,注射疫苗0.5 mL/只:1/2头份PRRS弱毒苗组3只,注射疫苗1 mL/只,全部后腿肌肉注射,共免疫2次,首免与二免间隔2周。分别于首免前和首免后不同时间点采血,分离血清,用ELISA和中和试验进行特异性抗体和中和抗体的检测,结果表明,免疫pIRES-E质粒组家兔均产生了抗PRRSV E蛋白的特异性抗体,并且有3只家兔检测到了中和抗体。
本研究用本实验室构建的PRRSV E基因的真核表达质粒plRES-E免疫家兔,不但诱导家兔产生了特异性抗E蛋白的抗体,而且产生了中和抗体,进一步验证了PRRSV E基因的免疫原性,并表明重组质粒pIRES-E可诱导机体产生一定的免疫效力,为进一步研制PRRS新型疫苗奠定了基础。
猪繁殖;呼吸综合征;PRRS病毒;免疫反应;DNA疫苗;PRRSV E基因
广西大学
硕士
预防兽医
罗廷荣
2008
中文
S858.28;S856.3
56
2008-11-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)