抗人端粒酶逆转录酶ScFv在转基因烟草中表达的初步研究
1983年世界首例转基因植物问世以来，转基因工程得以飞速发展。1989年Hiatt等人在植物中表达抗体，开创了利用转基因植物表达抗体的先河。现在多种基因工程抗体、酶、激素、血浆蛋白和疫苗等都已在植物的叶、茎、根、果实、种子以及植物细胞和器官中得到表达。近年来，SARS，禽流感的出现，艾滋病的迅速蔓延，给人类的生命和健康造成了巨大的威胁。因此，以动物生物器作为表达载体的各种抗体的安全性引起了人们高度警惕，利用植物生物器来表达各种对医疗、诊断、生物研究有着重要作用的抗体成为了科学界的热点。
近年来研究人员在肿瘤研究中发现大约85％的人类恶性肿瘤具有端粒酶活性，因此抑制端粒酶活性为抗肿瘤药物的设计提供了新的目标，端粒酶抑制剂便成为一种有效的新型抗肿瘤药物。一些学者的实验研究结果显示以端粒酶为靶位点的肿瘤治疗策略是可行的。20世纪70年代德国学者：Kohler和英国学者Milstein利用细胞融合技术首次成功地制备出单克隆抗体，与之相比单链抗体具有分子量小，免疫原性低，组织穿透力强、血流中半衰期短、特异性好等优点，并在原核细胞系统表达，在肿瘤的诊断和治疗方面展示了更好的应用前景。
本研究构建含抗人端粒酶逆转录酶单链抗体基因ScFv-hTEERT的植物表达载体p1304-SH，通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草叶片。转基因烟草植株叶片总DNA的PCR、Southern blot检测结果表明，ScFv-hTERT基因已整合进了转基因烟草植株基因组中；RT-PCR,SDS-PAGE分析证实目的基因蛋白已在烟草叶片中成功表达，竞争性EIJSA的结果表明，表达的重组抗体基因与其抗原有良好的结合活性。
转基因植物;端粒酶活性;抗肿瘤药物;转基因烟草
复旦大学
硕士
遗传学
任大明
2006
中文
Q788
56
2008-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）